沈晓莹，胡泽斌，张小燕，朱智东，亓垚，陈明敏，杨国翠，刘晶晶，任燕，徐成香，郜恒骏

    ·论著·

    PAPSS1的表达与脑胶质瘤临床指标和预后的相关性及对细胞增殖和凋亡的影响

    沈晓莹*，胡泽斌*，张小燕，朱智东，亓垚，陈明敏，杨国翠，刘晶晶，任燕，徐成香，郜恒骏

    201203 上海芯超生物科技有限公司(沈晓莹、张小燕、朱智东、亓垚、陈明敏、杨国翠、刘晶晶、任燕、徐成香、郜恒骏)；100850 北京，中国食品药品检定研究院体外诊断试剂所(胡泽斌)

    研究 PAPSS1 表达与脑胶质瘤临床指标和预后的相关性，及其对细胞增殖和凋亡的影响。采用免疫组化方法检测 PAPSS1、PDL1 蛋白在脑胶质瘤样本的表达，并纳入 SPSS 统计学分析。其中，PAPSS1 和 PDL1 之间及其与临床指标的相关性分析采用 Spearman 法；生存期单因素分析采用Kaplan-Meier 法和 log-rank 检验，将单因素分析中具有统计学意义的变量纳入 COX 多元回归生存分析。使用 siRNA 技术降低 PAPSS1 在脑胶质瘤细胞的表达。转染 48 h 后，利用 MTT 法检测细胞增殖比率，利用 Hochest/PI 法检测细胞凋亡率；PAPSS1、PDL1、ki67 和 Bcl2 等基因的表达变化使用qPCR 检测。上述实验数据采用 GraphPad 软件分析。1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 组织芯片 脑胶质瘤组织芯片(HBraG180Su02)购自上海芯超生物科技有限公司，包含180 例脑胶质瘤样本。病人的手术时间为 2008 年 2 月到 2011 年 10 月，随访到 2017 年 7 月，随访时间为 69 ～ 113 个月，失访 1 例。

    1.1.2 实验试剂 一抗 PAPSS1(14708-1-AP)购买于 Proteintech 公司；一抗 PDL1(GT2280)购于基因科技股份有限公司；HRP 标记的二抗(DM827)和二氨基联苯胺(DAB)购自 DAKO公司；脑胶质瘤细胞株 U87MG 和 U251MG 购自中国科学院上海生命科学研究院；10% 胎牛血清和 DMEM 培养液购自 Gibco 公司；转染试剂 Lipofectamine 2000 和逆转录酶SuperScript IV Reverse Transcriptase均购自 Thermo Fisher公司；小干扰RNAsiRNA-PAPSS1(简称 si-PAPSS1)和 siRNA-NC(简称NC)由基因制药公司合成；检测细胞增殖的 CCK8 试剂盒购自 Vazyme 公司；凋亡染色液 Hochest 和 PI 采购于 Beyotime Biotechnology 公司；Trizol 试剂购自美国 Sigma 公司；qPCR 反应试剂 SYBR?预混料 Ex-Taq? II(Tli RNaseH Plus)购自 Takara 公司；各基因的 qPCR 引物由上海生工合成 ......