刘卫德，刘绪平，章瑛，储梅君，鄢雷娜

    沙门氏菌(Salmonella)是常见的一类具有严重危害的致病性革兰氏阴性杆菌。据估计，全球每年由于沙门氏菌感染致病人数达 8000 万 ～ 9400 万，其中死亡人数达 5.9 万～ 15.5 万[1-2]。沙门氏菌在自然界中广泛分布，并可在动植物体定植，而中成药绝大部分都是由动植物加工炮制而成，且大量丸散膏丹的处方中常有原粉入药，因此，监测中成药中的沙门氏菌是评价药品质量的重要指标[3]。

    沙门氏菌检测分析主要可分为传统培养分离法、免疫学方法及分子生物学方法[4]。传统培养分离法操作简单、成本低，但操作过程及检测周期长，单一方法对部分血清型灵敏度及特异性也不够[5-6]；免疫学方法具有检测迅速、特异性强等特点，但是其检测灵敏度相对较低，同时难以进行大批量检测[7-8]；分子生物学方法兼具检测特异性强、灵敏性高、检测周期短等特点，近年来发展迅速[9-11]，但其在药品沙门氏菌检测中的应用探索不多。而 2020年版《中国药典》与前几版药典保持一致，沙门氏菌检测方法仍采用传统培养分离法[12]。为探索分子生物学方法在中成药沙门氏菌检测中的可行性，本研究拟基于实时荧光 PCR 技术，建立一种中成药中沙门氏菌的特异性检测方法，为药品中沙门氏菌的快速检测提供技术参考。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 仪器 SPL-250 生化培养箱购自天津市莱玻特瑞仪器设备有限公司；恒温培养摇床购自上海新苗医疗器械制造有限公司；荧光定量 PCR 仪 CFX96Touch、定性 PCR 仪C1000、基础电泳仪 PowerPac Basic、凝胶成像仪 ChemiDoc MP均为美国 Bio-Rad 公司产品；超微量紫外/可见分光光度计 Spectra Max Quick Drop购自美谷分子；台式高速冷冻离心机 5424R 为艾本德股份有限公司产品。

    1.1.2 试剂与培养基 缓冲蛋白胨水(BPW)、胰酪大豆胨液体培养基(TSB)、乳糖肉汤培养基(LB)、营养肉汤培养基(NB)及 90 mm 胰酪大豆胨琼脂培养基(TSA)预制平皿均购自北京陆桥生物有限公司；Es Taq DNA Polymerase(5 U/μl)购自康为世纪生物科技有限公司。

    1.1.3 菌种 乙型副伤寒沙门氏菌购自中国食品药品检定研究院。

    1.1.4 药品 女金胶囊(批号 1708080)购自江西汇仁药业股份有限公司；牛黄蛇胆川贝液(批号 180512)购自江西南昌桑海制药厂；健胃消食片(批号 18012001)购自江中药业股份有限公司；乌鸡白凤丸(批号 171201)购自江西药都樟树制药有限公司 ......