李霓，韩江雪，姜新海，许艳妮，司书毅

    低密度脂蛋白受体(low-density lipoprotein receptor，LDLR)是细胞表面型受体，在肝脏细胞中呈高表达，它通过胞吞作用将血浆中的 LDL-C转运至肝脏中进行代谢，从而降低血浆中 LDL-C水平，是治疗动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)疾病的重要靶点[1-2]。LDLR 的表达受到转录水平及转录后水平的调控，其转录水平主要受固醇调控元件结合蛋白-2(sterol regulatory element binding protein-2，SREBP-2)的调控[3]；除此之外，LDLR的诱导型降解因子(inducible degrader of the LDL receptor，IDOL)和前蛋白转化酶枯草溶菌素 9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9，PCSK9)能够通过转录后水平对 LDLR 的表达进行调控[4-5]。

    IDOL 是一个依赖于固醇调节的 E3 泛素连接酶，能够介导 LDLR 泛素化进而经溶酶体途径降解，主要受到肝 X 受体(liver X receptor，LXR)的调控，这与 PCSK9 对 LDLR 的降解机制有所不同[4,6]。IDOL 包含两个主要功能结构域，即 N端的 FERM 区和 C 端的 RING 区[7]。FERM 区负责与 LDLR 胞内部分相结合，RING 区与泛素结合酶 E2D(ubiquitin conjugating enzyme E2D，UBE2D)结合，随后 LDLR 被 UBE2D 泛素化修饰，最终导致 LDLR 在溶酶体降解[8]。研究表明，抑制 IDOL 对 LDLR 的降解将有效提高肝脏LDLR 表达，有利于减少血浆中 LDL-C 水平[9]。因此，抑制 IDOL/LDLR 蛋白相互作用是抗 AS 药物研发的新思路。有学者对 IDOL 与 LDLR 的相互作用以及降解机制进行了透彻的研究，并通过同源模建、染色质免疫共沉淀等手段确证了两个蛋白的结合界面[10]。荧光偏振(fluorescence polarization，FP)技术具有简便、高效、重复性好的优势，是体外水平研究蛋白质相互作用的重要方法[11]。

    本实验通过原核表达并纯化获得人全长 IDOL重组蛋白，将能够与 IDOL-FERM 区相结合的LDLR 多肽片段进行异硫氰酸荧光素(fluorescence isothiocyanate，FITC)荧光标记，利用荧光偏振方法 ......