朱思睿，屈哲，杨艳伟，刘鑫磊，黄芝瑛，周晓冰，李波

    ·论著·

    大鼠急性肾损伤模型中15种新型尿液生物标志物的评价研究

    朱思睿，屈哲，杨艳伟，刘鑫磊，黄芝瑛，周晓冰，李波

    100176 北京，中国食品药品检定研究院国家药物安全评价监测中心，药物非临床安全评价研究北京市重点实验室(朱思睿、屈哲、杨艳伟、刘鑫磊、周晓冰、李波)；510006 广州，中山大学药学院(朱思睿、黄芝瑛)

    评价短期采尿下 15 种新型尿液生物标志物对药物肾毒性的诊断效能。Wistar 大鼠连续腹腔注射 120 mg/kg 庆大霉素构建急性肾损伤(AKI)模型。分别在检疫期、给药第 5、8 天采集动物 5 h 尿液和血样，并解剖动物，进行肾脏病理学检查。全自动生化分析仪检测各组动物的血清和尿生化。应用 Luminex 液相芯片方法检测分析尿液生物标志物浓度，与传统肾功能指标尿素氮(BUN)和肌酐(CRE)进行比较。组织病理学结果显示，给药动物出现典型急性肾损伤变化，并呈明显时间相关性；与对照组比较，干扰素诱导蛋白-10(IP-10)和 β2-微球蛋白(β2-MG)在给药第 5 天就显著升高，且持续增加。在给药第 8 天，除表皮生长因子(EGF)、骨桥蛋白(OPN)两种生物标志物以外，尿液中其他 8 种生物标志物浓度均明显升高(1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 药物及主要试剂 庆大霉素购自美国 Sigma-Aldrich 公司；Luminex 液相芯片大鼠肾毒性试剂盒购自美国 Merck Millipore 公司。

    1.1.2 仪器 7180型全自动生化分析仪购自日本 Hitachi公司；Magpix 型液相芯片分析平台购自美国 Luminex 公司。

    1.1.3 动物及饲养条件 体重为 230 ～ 270 g 的雄性 SPF/VAF 级 8 周龄Wistar 大鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司。实验动物饲养于屏障环境，温度：20 ～ 26 ℃，日温差< 3 ℃，相对湿度：40% ～ 70%，最小换气次数 15 次/h，12 h/12 h 明暗周期，自由摄食饮水。本试验方案及操作均经过动物福利伦理委员会(IACUC)审查批准。

    1.2 方法

    1.2.1 庆大霉素诱导急性肾损伤大鼠模型的构建 将 32 只雄性 Wistar 大鼠入室后检疫驯化，合格后，根据最新体重将动物随机均分为对照组和庆大霉素给药组，每组 16 只。庆大霉素给药组每天按 120 mg/kg 剂量腹腔注射给药 1 次 ......