胡尚玖，王莹，张国宁，朱梅，王明华，王菊仙

    ·论著·

    白蛋白美登素偶联物的制备及其体外抗胰腺癌活性研究

    胡尚玖，王莹，张国宁，朱梅，王明华，王菊仙

    100050 北京，中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所有机合成室

    制备人血清白蛋白(HSA)与美登素衍生物 mertansine(DM1)的偶联物，评价其体外抗胰腺癌细胞活性。以安丝菌素为原料经还原、酯化等反应制得美登素衍生物 DM1，以 N-羟基琥珀酰亚胺与马来酸酐为原料反应制得连接子 SMCC，通过连接子 SMCC 将 DM1 与人血清白蛋白偶联制得偶联物 HSA-DM1，采用 HPLC、MALDI-TOF 对其进行表征并计算平均偶联比。采用 CCK-8 法测定偶联物对 MIA PaCa-2、PANC-1 和 BxPC-3 三种胰腺癌细胞系的增殖抑制作用；利用流式细胞术和 Western blot 法测定其对 MIA PaCa-2 和 PANC-1 细胞的促凋亡能力。成功制备偶联物 HSA-DM1，其平均偶联比为 3.32，对MIA PaCa-2、PANC-1 和BxPC-3 三种细胞系的 IC50值分别为(48.2 ± 6.5)、(55.0 ± 4.7)、(84.0 ± 11.8)nmol/L，同时其对 MIA PaCa-2 和 PANC-1 细胞的促凋亡作用呈剂量依赖。偶联物 HSA-DM1 具有显著抑制胰腺癌细胞增殖的活性，具有潜在的临床应用前景。

    人血清白蛋白； 美登素衍生物； 偶联物； 胰腺癌

    胰腺癌作为最致命的癌症之一通常在晚期才会被确诊，同时它具有极强的侵袭性，导致大多数患者无法通过手术实现根除性切除，且对大多数常规治疗方案具有显著抗性[1]，这些特性致使胰腺癌患者五年内生存率仅有大约 8%[2]。

    基因编码的 Ras 蛋白质是一种小型 GTP 酶，是细胞多个调控过程中的分子开关[3]。90% 的胰腺癌是胰腺导管癌，而其中 95% 的胰腺导管癌都存在突变[4]。研究表明，突变会增强细胞的巨胞饮作用[5]，这是一种内吞作用，其机制是细胞外液经细胞膜内陷包裹形成囊泡(巨胞饮体)进入细胞内，摄入的物质会在溶酶体中降解，以支持新陈代谢和大分子的合成。研究证明突变的癌细胞，例如胰腺导管癌细胞会通过巨胞饮作用吞噬白蛋白来获得谷氨酰胺等氨基酸以维持癌细胞的增殖[5]，通过该方法癌细胞可以绕过一些氧依赖性的关键代谢途径，以提高在缺氧条件下的生长能力。

    Kratz[6]发现白蛋白及白蛋白相关药物会特异性聚集于突变的胰腺癌细胞及组织 ......