气滞血瘀证大鼠NO/NOS体系的变化
灰阶,低剂量,1材料与方法,2结果,3讨论
宁天一 王婷婷 姜 静 程嘉艺(辽宁中医药大学,沈阳,110032)
气滞血瘀证是指气机阻滞而致血行瘀阻所表现的证候。常因情志不遂,闪挫外伤或寒邪内阻等所引起。临床表现胸胁胀满或走窜疼痛,性情急躁,胁下痞块,刺痛拒按,入夜更甚,或妇女痛经,经色紫暗,夹有瘀块,舌紫暗或有瘀斑等。气是人体内至精至微的生命物质,是生命活动的重要物质基础,具有推动血液的生成、运行,以及津液的生成、输布和排泄等功能。中医“气”的概念较难把握,但“气”毕竟是物质的,有其物质基础才能完成其重要功能。为了初步探讨 “气”的本质与气体信号分子的相关性,本实验复制气滞血瘀病症模型,观察其模型体内气体信号分子NO的变化情况,研究是否与中医理论中的“气”存在相关性,为血瘀证及活血化瘀方药的研究提供一个新的思路。
1 材料与方法
1.1 试剂 NO试剂盒(20111123)、NOS试剂盒(20111123)(南京建成生物工程研究所),Trizol(D9108A)、RT-PCR试剂盒(DRR019A)、琼脂糖(D601)、Marker(D526A)引物(宝生物工程(大连)有限公司)。
1.2 实验动物与分组 SPF级健康wistar大鼠,雌雄各半,体重180g~200g,随机分成4组,分别为对照组、模型组、血府逐瘀汤低剂量组和高剂量组。
1.3 复制模型 采用多因素联合刺激法造模[1]。刺激因素包括声、光、电、冰水浴、束缚、夹尾,每天刺激2次,持续5周时间。
1.4 血浆NO含量测定 NO产生后在体内迅速转化亚硝酸盐(NO2-)和硝酸盐(NO3-),而 NO2-又进一步转化为NO3-。利用硝酸还原酶特异性地将NO3-还原NO2-,通过显色深浅测定 NO2-浓度高低[2] ......
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