孙叙敏 陈信义

    (1 煤炭总医院中医科，北京，100028;2 北京中医药大学东直门医院肿瘤血液科，北京，100700)

    研究发现，周期素D1(Cyclin D1)的过度表达在许多恶性肿瘤的发生、发展中起着重要的作用[1-5]，下调Cyclin D1的表达进而影响肿瘤细胞G1/S的过渡在一定程度上可以抑制增殖，延缓进展[6-7]，并增强肿瘤细胞对药物的敏感性[8]。CD44 属于黏附分子家族成员之一，目前研究主要致力于CD44 与恶性肿瘤临床病理特点的关系上，研究结果尚不统一[9]，多数研究认为CD44的过度表达参与了恶性肿瘤的发生、转移，推测其可能成为恶性肿瘤的不良预后因子。本研究采用免疫组化技术，集中观察经典古方宋“两仪膏”改制成的复方制剂复方阿胶浆对Cyclin D1、CD44 表达的影响，古方新用，从抗肿瘤机制方面探索复方阿胶浆的临床应用。

    1 材料与方法

    1.1 材料 雄性C57BL/6 小鼠108只，清洁级，体重15～18 g，购于中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心[许可证号:SCXK(军)2007-004]，于中国医学科学院肿瘤研究所SPF 级动物室饲养。Lewis 肺癌(Lewis Lung carcinoma LLC)瘤源由中国医学科学院肿瘤研究所提供。复方阿胶浆(阿胶、党参、人参、熟地黄、山楂)，20 mL/支，山东东阿阿胶股份有限公司制备并提供(批号:091146);注射用环磷酰胺(CTX)，200 mg/支，山西普德药业有限公司，国药准字H14023686。兔抗CD44(批号:BA0321)一抗、兔链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)试剂盒SP900l、DAB 显色剂(批号:AR1022)均购自武汉博士德公司、兔抗CyclinD1(批号:bs-0623R)一抗购自北京博奥森生物技术有限公司。Olympus 公司IMT-2 倒置显微镜;美国Diagnostic Instrument Inc Spot-II 数码成像系统。

    1.2 方法

    1.2.1 造模及分组 荷lewis 肺癌的C57BL/6 小鼠脱颈处死，完整剥离瘤块，以生理盐水研磨，调细胞密度约2×107/mL(台盼蓝计数活细胞>90%)，每只小鼠右腋皮下接种0.2 mL。接种后第3日，按体重随机分为6组，分别为模型对照组、CTX组、复方阿胶浆组(中剂量)、复方阿胶浆(大、中、小剂量)联合CTX组，每组10只，称体重并编号[10]。

    1.2.2 给药方法 模型对照组予生理盐水0.4 mL ......