孟凡荣 马建伟 赵宗江，3

    (1大连医科大学，大连，116110;2空军总医院中医科，北京，100142;3北京中医药大学基础医学院，北京，100029)

    DN是糖尿病最常见、最严重的微血管并发症之一。糖尿病肾病肾小球硬化(Glomerulosclerosis，GS)是所有慢性肾脏疾病进行性发展至终末期的共同通道，最终可导致慢性肾功能衰竭。因此，早期治疗对于延缓或逆转GS以减少终末肾的发生有着重要的意义。从细胞水平上来看，系膜细胞(Mesangial Cell，MC)过度增殖及细胞外基质(Extracellular matrix，ECM)的过度生成和聚积是肾小球硬化早期的病理改变[1]。目前GS的西医防治措施较有限，因此，从中医药中寻找有效的防治药物将为延缓及治疗DN提供有效的途径。滋肾通络方是治疗DN临床疗效较好的经验方。我们以往的实验研究表明，该方对DN大鼠肾脏具有明显的保护作用[2-10]。本研究以高糖环境下系膜细胞增殖为模型，观察滋肾通络方对其增殖的影响，其目的在于进一步探讨该复方防治DN的机制。

    1 实验材料

    1.1 动物和GMC细胞株 SD雄性大鼠15只，SPF级，购自于北京华阜康生物股份有限责任公司。大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)株，购于上海坤肯生物化工有限公司(QK10144)。

    1.2 仪器与试剂 超净工作台、恒温CO2培养箱、倒置相差显微镜、450型自动酶标仪(MuLtiskan Ascent)。胎牛血清(四季青Lot:No.061024)，RPMI-1640培养基 (GIBICOLot:No.663264)，MTT(SigmaLot:No.BS0881)，二甲基亚砜(DMSO)(AMRESCO公司:Lot:No.0231)，胰蛋白酶1∶250(Gibco Lot:No.41500-067);LPS(Sigma Lot:No.DH183-10);EDTA(Sigma Lot:No.40-3)。

    1.3 药物 滋肾通络复方药材由北京市同仁堂提供;苯那普利胶囊:规格10 mg/片，为北京诺华制药公司产品，产品批号SD26003。

    2 方法

    2.1 含药血清的制备 将SD大鼠适应性喂养1周后 ......