食积因素对FM1流感病毒感染小鼠免疫功能影响的实验研究
细胞因子,1材料与方法,2结果,3讨论
施金凤 于 河 王 上 谷晓红(1河南省郑州市第二中医院,郑州,450002;2北京中医药大学,北京,100029;3湖北中医药大学,武汉,430061)
小儿脏腑娇嫩,形气未充,肺脾常不足,且寒暖不能自调,乳食不知自节易于形成食积,外易受六淫所侵而发病,临床多以呼吸系统为多[1]。加之小儿体属“纯阳”,呼吸道黏膜防御机制不够完善,故感邪易从热化而成急性外感热病。中医学认为积食积热可促进肺热证的发生、发展,如叶天士所言:“胃肠为市,故阳明为成温之薮也”。临床发现,食积小儿容易发生急性呼吸系统感染,而具体病理机制尚待进一步发掘探索。有研究发现流感病毒感染与机体免疫功能失调有密切关系[2],而细胞因子在感染性疾病的发生、发展中起着重要的作用。有学者认为T辅助淋巴细胞TH1/TH2的功能可以反应机体促炎和抗炎反应的失衡情况[3]。TH1细胞主要分泌干扰素γ,TH2细胞则主要分泌IL-4,本研究试图从TH1(IFN-γ)和TH2(IL-4)平衡的角度来探讨食积因素在病毒感染状态下细胞因子谱的改变,以明确其对机体免疫功能的影响。尝试揭示食积影响肺系热证的发展变化的作用机制,为临床肺胃同治提供依据,对于急性呼吸系统传染病的防治有一定指导意义。
1 材料与方法
1.1 动物分组 昆明小鼠,雄性,体重11~13 g,180只,清洁级,购于北京维通利华实验动物技术有限公司[SCXK(京)2006-0009]。购入后置免疫教研室动物房实验动物洁净柜饲养。将小鼠按体重随机分为3组:正常组、单纯感染组、食积感染组,每组60只。
1.2 模型制作 正常组:正常饲料,不限食水。从实验第1天起,予生理盐水按0.2 mL/10 g灌胃,2次/d,共灌胃4 d。于第5天乙醚麻醉后,给予生理盐水50 μL滴鼻。单纯感染组:正常饲料,不限食水。从实验第1天起,予生理盐水按0.2 mL/10 g灌胃,2次/d,共灌胃4 d。于第5天乙醚麻醉后,予FM1流感病毒50 μL滴鼻。食积感染组:自制高蛋白、高热量饲料(豆粉、面粉、牛奶粉、鱼肉松,四者按2∶1∶1∶1 比例配制),不限食水。从实验第1天起,予52%浓度的牛乳按0.2 mL/10 g灌胃,2次/d,共灌胃4 d。于第5天乙醚麻醉后,予流感病毒50 μL滴鼻。
1.3 主要试剂及药物 免疫球蛋白M酶联免疫试剂盒IgM(201103)ELISA;白介素4酶联免疫试剂盒IL-4(201102)ELISA、干扰素γ酶联免疫试剂盒IFN-γ(201102)ELISA IT:北京康源瑞得生物技术有限公司提供;病毒:流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株(FM1)由北京中医药大学免疫学教研室提供 ......
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