姜露散对大鼠感染性创面提脓祛腐的作用及机制
溶菌酶,肉芽,1材料与方法,2结果,3讨论
王佳雯 陆金根 曹永清 潘一滨(上海中医药大学附属龙华医院肛肠科,上海,200032)
升丹是目前临床应用的主要提脓祛腐药物。但近年临床和动物实验均表明溃疡创面应用升丹都会有不同程度的汞吸收,其毒性有蓄积性,可对内脏等造成损害,甚至可以引起中毒致死。其他类提脓祛腐药物大多数也是有毒性的药物。因此,寻求高效、无毒的升丹替代品无疑成为中医外科工作者迫在眉睫的任务[1-3]。上海中医药大学附属龙华医院陆金根教授通过对古代医籍和现代文献的回顾性理论研究[4-19],并结合中医外科多年的临床用药经验,拟方姜露散。本研究通过动物实验,观察该方对感染性创面提脓祛腐的作用,并探讨其作用的可能机制及用药安全性,为中药提脓祛腐药物提供高效、无毒的升丹替代品。
1 材料与方法
1.1 动物 健康SD大鼠72只,SPF级,体质量200~220 g/只,由上海斯莱克实验动物有限公司提供,饲养于上海中医药大学附属龙华医院科研中心。
1.2 药物 姜露散由上海中医药大学附属龙华医院制剂室制备。九一丹由上海华鹰药业有限公司提供。
1.3 细菌 采用上海市临床检验中心提供的大肠埃希菌标准菌株(ATCC 25922),配制成浓度为5亿菌株/mL的大肠埃希菌混悬液。
1.4 主要试剂与仪器 溶酶体抗体(美国Santa Cru)、EnVision 试剂即用型(丹麦 Dako)、3'3 - 二氨基联苯胺盐酸盐(DAB)显色液试剂盒(武汉博士德)、大鼠IL-1β定量ELISA试剂盒(美国RD);生物显微镜(Olympus BH2)、数码相机(Nikon E4500)、紫光分光光度计(日本Beckman Du-600)、全自动生化检测分析仪(OLYMPUS AU460)。
1.5 方法
1.5.1 分组、造模与给药 参照上海中医药大学附属曙光医院张雅明[20]以及南京市中医院郑雪平[21]等造模方法,并改良付小兵[22-23]全层皮肤缺损法建立大鼠感染性创面模型。在麻醉后的大鼠颈背部作一直径2 cm的圆形切口,深达肌筋膜,破坏部分肌肉表面筋膜,止血后在创面上覆盖大小相仿的纱布,纱布中浸入新培养的大肠埃希菌标准菌株1 mL(约5亿菌株)。3 d后,创口表面附有脓性分泌物,周围皮温略升高,感染性创面模型造模成功。将大鼠随机分为三组:姜露散组、九一丹组、模型组,每组24只。造模各组大鼠每天分别给予姜露散、九一丹创面换药,模型组给予生理盐水创面换药,1次/d,连续治疗14 d。
1.5.2 观察大鼠一般情况 包括精神状态、活动情况、进食量、大小便情况 ......
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