张 风 陶艳艳,2 陈高峰,2

    (1 上海中医药大学附属曙光医院·肝病研究所，上海，201203; 2 肝肾疾病病证教育部重点实验室，上海，201203)

    改良PAS染色法在急性肝损伤中的应用

    张 风1陶艳艳1,2陈高峰1,2

    (1 上海中医药大学附属曙光医院·肝病研究所，上海，201203; 2 肝肾疾病病证教育部重点实验室，上海，201203)

    目的：观察改良肝脏糖原PAS染色法，并观察肝脏糖原染色在急性肝损伤中的应用。方法：复制CCl4急性肝损伤模型，首次100% CCl43 mL/kg皮下注射，此后50% CCl4橄榄油溶液2 mL/kg每周2次共4次皮下注射，诱导大鼠急性肝损伤模型。计算大鼠肝体比；HE染色观察肝组织炎症病理；试剂盒检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBil)、白蛋白(Alb)。肝脏常规PAS染色与改良PAS染色观察肝糖原染色。结果：与正常组相比，模型组ALT、AST活性与TBil含量明显升高(P1 材料

    1.1 动物 Wistar大鼠20只，雄性，SPF级，体重160～170 g，购自北京维通利华实验动物有限公司，许可证号SCXK(京)2012-0001，饲养于上海中医药大学实验动物中心，设施许可证号：SYXK(沪)2009-0069，所有动物均自由饮食。

    1.2 主要试剂 四氯化碳(Carbon Tetrachloride，CCl4)，化学纯，批号20140325；橄榄油，化学纯，批号F20110402，均购自国药集团；丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBil)、白蛋白(Alb)购自上海科华生物。肝糖原过碘酸希夫染色(Periodic Acid-schiff，PAS染色)试剂盒糖原染液试剂盒(批号20140925)，购自南京建成生物工程研究所。

    2 方法

    2.1 模型制备 CCl4急性肝损伤模型参照经典造模法[6-9]并改进。本实验染毒5次，即第1、4、7、10、13天上午9点各1次。首次皮下注射100% CCl43 mL/kg大鼠体重，此后50% CCl4橄榄油溶液2 mL/kg大鼠体重。正常组大鼠皮下注射相同容积的橄榄油溶液。

    2.2 分组 Wistar大鼠20只 ......