周留勇 尤建良 单珍珠 张辰岑 龚时夏

    (无锡市中医医院肿瘤科，无锡，214071)

    复脉膏外敷对大鼠长春瑞滨外渗性损伤组织中VEGF的影响

    周留勇 尤建良 单珍珠 张辰岑 龚时夏

    (无锡市中医医院肿瘤科，无锡，214071)

    目的：建立大鼠长春瑞滨外渗性组织损伤的理想实验模型，在此动物模型上研究复脉膏外敷对外渗性损伤组织中VEGF的影响，以探讨复脉膏外敷治疗化疗性静脉炎的疗效及机制。方法:42只大鼠随机分为2组：复脉膏组、50%硫酸镁组，21只/组，建立实验模型。2组大鼠左侧损伤处分别予复脉膏外敷、50%硫酸镁湿敷；右侧予生理盐水外敷作为对照组。在损伤后第1、4、7、11、14、18天，分别随机取3只大鼠，切除损伤部位的皮肤及皮下组织，固定标本，脱水、石蜡包埋，连续切片，采用免疫组化标记及图像分析方法，在电子显微镜下观察VEGF的表达情况。结果：VEGF阳性表达主要见于表皮细胞、血管内皮细胞、毛囊上皮细胞胞浆、渗出的巨噬细胞、增生的成纤维细胞胞浆。复脉膏外敷较硫酸镁湿敷及生理盐水外涂能明显刺激长春瑞滨外渗性损伤组织中VEGF的阳性表达(P1 实验材料

    1.1 实验动物 SD大鼠60只，雌雄不限，(205±20)g/只，清洁级，由扬州大学比较医学中心提供，生产许可证：SCXK(苏)2007-0001。

    1.2 主要仪器 RM2135型石蜡切片机(德国LEICA公司)、CHK2-F-GS显微镜(日本OLYMPUS公司)、BX41图像采集系统(日本OLYMPUS公司)。

    1.3 主要试剂 复脉膏(由无锡市中医医院制剂室提供)，长春瑞滨注射液(江苏豪森药业股份有限公司出品，批准文号：国药准字H19990278，规格：10 mg/瓶)，50%硫酸镁(上海鹤善实业有限责任公司出品)，鼠单抗VEGF多克隆抗体(工作浓度1：150)、免疫组化SP试剂盒、DAB显色剂(美国EPITOMICS公司出品)，安尔碘Ⅱ型皮肤消毒剂(上海利康消毒高科技有限公司，生产批号：20111105)。

    2 实验方法

    2.1 皮肤准备 用3%戊巴比妥钠40 mg/kg腹腔注射麻醉后，以股骨小头为标志，其上方1.5 cm处作为中心，采用刮毛刀刮除直径约3.0 cm范围毛，用温清水洗净脱毛部位皮肤，观察48 h，脱毛部位皮肤完好。

    2.2 实验模型 1)取SD大鼠18只，随机分为6组，3只/组，用3%戊巴比妥钠40 mg/kg腹腔注射麻醉后，安尔碘Ⅱ型皮肤消毒剂常规消毒 ......