李秀荣 齐元富 李慧杰

    (山东中医药大学附属医院，济南，250014)

    芪连扶正胶囊对TGF-β介导EMT作用的影响

    李秀荣 齐元富 李慧杰

    (山东中医药大学附属医院，济南，250014)

    目的：观察芪连扶正胶囊含药血清对TGF-β及EMT相关分子在肺癌A549细胞中表达的影响，探讨相关机制。方法：体外培养肺癌A549细胞，制备芪连扶正胶囊含药血清，分组干预，采用RT-PCR检测TGF-β1mRNA表达，IC检测E-cad与N-cad表达。结果：对照组、芪连扶正低剂量、中剂量、高剂量组、化疗组及联合组的TGF-β1 mRNA相对表达量依次为(31.11±1.58)%、(29.53±1.50)%、(27.28±1.75)%、(25.23±1.38)%、(23.03±1.59)%、(20.72±1.38)%；各组E-cad、N-cad均有不同程度阳性表达，除芪连扶正胶囊低剂量组外，各药组E-cad阳性率均高于对照组、N-cad则相反(P1 材料与方法

    1.1 细胞与动物 高转移人肺腺癌细胞系A549细胞株，购自山东省医学科学院细胞室。SPF级SD雄性大鼠，购自山东中医药大学实验动物中心，质量合格证编号为SCXK(鲁)20110003。

    1.2 药品试剂 芪连扶正胶囊(山东中医药大学附属医院药剂科，批号：Z0120030239)，顺铂(DDP，齐鲁制药有限公司，批号：207062DC)。胎牛血清(浙江天杭生物科技有限公司)，改良型RPMI-1640培养基(赛默飞世尔生物化学制品有限公司)，兔抗人E-cad多克隆抗体(编号：BA0475)、兔抗人N-cad多克隆抗体(编号：BA0673)、浓缩型SABC试剂盒、DAB显色试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)，总RNA提取试剂盒、SuperRT二步法RT-PCR试剂盒(北京康为世纪生物科技有限公司)。TGF-β1与β-actin引物：由上海生工生物技术有限公司合成，TGF-β1上游5’-CAGACTCTAGAGACTGTCAG-3’，下游5’-GTCACCAGAGAAAGAGGAC-3’，分子量：384bp；β-actin上游5’-TCCTCCCTGGAGAAGAGCTA-3’，下游5’-TCAGGAGGAGCAATGATCTTG-3’，分子量：302 bp。

    1.3 主要仪器 超净工作台(美国Thermo Forma公司)，CO2培养箱、鼓风干燥箱、超纯水系统(德国Heraeus公司)，倒置相差显微镜(日本Olympus公司) ......