含左归丸鼠血清对3T3-L1前脂肪细胞芳香化酶mRNA表达的影响
去势,1材料与方法,2结果,3讨论
胡 翔 王 静 陆 华(1成都中医药大学,成都,610075;2成都中医药大学第二附属医院,成都,610041)
中医学认为女性绝经前后诸症主要以肾阴虚证为主[1],临床实践证明中医补肾填精法对潮热心悸[2]、阴道干涩、烦躁易怒、记忆力下降等低雌激素症状体征有明显改善[3-4]。左归丸出自明代医家张景岳的《景岳全书·新方八阵》,为补益肾阴经典方,临床上可用于治疗女性绝经前后诸症[5-6]。
现代研究发现:绝经后女性卵巢功能衰退,体内主要通过性腺外组织(脂肪组织间充质细胞[7]等)以肾上腺皮质产生的雄烯二酮为底物通过芳香化酶(Romatase Cytochrome P450,P450arom)的催化作用生成雌酮,再转化为活性强的雌二醇(Estradiol,E2)发挥作用。脂肪是女性绝经后体内雌激素合成的主要部位之一[8],健康绝经后女性的内脏脂肪在制造和转化雌酮上比外周脂肪更为重要[9]。3T3-L1前脂肪细胞是Green和Kehinde于1974年从Swiss3T3小鼠胚胎中分离克隆所得,是目前国际上公认的研究成脂过程的细胞株,能较好地模拟活体脂肪组织的功能[10-11],可作为研究脂肪组织芳香化酶表达的体外实验载体[12]。本研究以3T3-L1前脂肪细胞为平台,观察含左归丸去势大鼠血清对体外培养的3T3-L1前脂肪细胞芳香化酶mRNA表达的影响,探索左归丸改善绝经后低雌激素水平症状的作用机理。
1 材料与方法
1.1 实验动物及环境 育龄期雌性♀SD大鼠,(230±30)g,77只;购于成都中医药大学实验动物中心,饲养于二级动物实验室,合格证:SCXK(川)2004-11。室温22~25℃,湿度45% ~65%,昼夜明暗交替时间为12∶12 h。
1.2 主要药物和试剂 左归丸(上海雷允上封滨制药有限公司),成人剂量18 g/d,批号:040810;倍美力(惠氏艾尔斯特制药公司艾尔斯特药厂生产),规格:0.625 mg/片,批号:PKG0404001;戊巴比妥钠(上海化学试剂公司进口分装),批号:F20020405;雌二醇试剂盒(Alpha Diagnostic International公司),批号:05114-B;3-异丁基 -1-甲基黄嘌呤(Isobuthyl-methylxan-thine,IBMX)、地塞米松(Dexamethasone,Dex)、胰岛素(Insulin,Ins)均购于 Sigma公司;RT-PCR试剂盒:Takara,Lot:BK3101;Mouse Aromatase Primer:上海申能博彩生物科技有限公司 ......
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