周会芳 张密霞 高 丽 庄朋伟 徐 倩 张艳军

    (1 天津中医药大学中西医结合学院,天津,300193; 2 天津中医药大学中药学院,天津,300193)

    脐带间充质干细胞移植对老年痴呆小鼠SAMP8学习记忆的影响

    周会芳1张密霞2高 丽2庄朋伟2徐 倩1张艳军2

    (1 天津中医药大学中西医结合学院,天津,300193; 2 天津中医药大学中药学院,天津,300193)

    目的:探讨脐带间充质干细胞(HUMSCs)移植对老年痴呆小鼠SAMP8学习记忆能力的影响。方法:培养人脐带间充质干细胞,通过尾静脉以高中低3个剂量(2.5×105/0.2 mL/20 g、5×105/0.2 mL/20 g、1×106/0.2 mL/20 g)分别向7月龄SAMP8老年痴呆小鼠移植HUMSCs,并设立移植生理盐水组和R1小鼠正常对照组。HUMSCs移植45 d后,MORRIS水迷宫和跳台实验检测其学习记忆能力。结果:与R1正常对照小鼠比较,SAMP8老年痴呆小鼠生理盐水组学习记忆能力明显降低;和移植生理盐水组比较,细胞移植低剂量组水迷宫逃避潜伏期显著缩短(P1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 实验动物 SAMP8老年痴呆小鼠,7月龄40只,对照组R1小鼠10只,由天津中医药大学第一附属医院提供,标准鼠饲料常规饲养。

    1.1.2 细胞与试剂 人脐带间充质干细胞:协和干细胞基因工程有限公司提供。DMEM/F12、EGF、bFGF、谷氨酰、EDTA(Sigma公司);特优级胎牛血清(Bioind公司);青、链霉素(invitrogen公司);CO2恒温培养箱(Forma 3110，Thermo);倒置相差显微镜(DC300F,Leica),MORRIS水迷宫(DMS-2型,中国医学科学院药物研究所);YLS-3TB跳台记录仪(济南益延科技发展有限公司)。

    1.2 实验方法

    1.2.1 脐带间充质干细胞培养 购买脐带间充质干细胞,以完全培养基培养进行培养(完全培养基为:DMEM/F12,含10%FBS、1%PS、1%LG、0.5%EGF、0.5%bFGF),每2～3 d换液,细胞长至80%融合后传代,培养至稳定生长的第3代。

    1.2.2 实验分组和细胞移植 实验共分为5组,将40只SAMP8老年痴呆小鼠分为4组,每组10只,细胞移植高中低3个剂量组和移植生理盐水组,正常对照组(R1小鼠10只)。将第3代HUMSCs接种于75 cm2培养瓶,待细胞长至70%融合,胰蛋白酶-EDTA消化,调整细胞至所需浓度,通过尾静脉移植以2.5×105/0.2 mL/20 g、5×105/0.2 mL/20 g、1×106/0.2 mL/20 g 3个剂量分别对SAMP8进行移植,生理盐水组和正常对照组都尾静脉注射生理盐水 ......