翟献斌 吴方云

    (山东省泰安市中医医院骨科，泰安，271000)

    接骨丹介导成骨细胞增殖促进骨折愈合的观察

    翟献斌 吴方云

    (山东省泰安市中医医院骨科，泰安，271000)

    目的：观察接骨丹对新西兰乳兔成骨细胞增殖的影响，探讨接骨丹促进骨折愈合的机制。方法：普通级新西兰大白乳兔，耳缘静脉空气栓塞处死，无菌条件下取颅盖骨，Ⅰ型胶原酶消化法获取成骨细胞并进行体外培养、鉴定及传代。将鉴定后的第二代成骨细胞随机分为正常对照组及实验组,正常对照组应用正常兔血清培养,实验组应用接骨丹含药血清培养,MTT法观测2组细胞的生长曲线；不同血清干预48 h后，倒置显微镜观测接骨丹对成骨细胞碱性磷酸酶及Ⅰ型胶原表达的影响，Elisa法观测接骨丹对成骨细胞培养上清液中骨钙素表达的影响。结果：Ⅰ型胶原酶消化法成功获取并建立成骨细胞体外培养体系，MTT观测显示实验组能够显著促进成骨细胞的增值，倒置显微镜观测实验组中碱性磷酸酶及Ⅰ型胶原的表达要优于正常对照组，并能够促进成骨细胞分泌骨钙素。结论：接骨丹能够促进骨折的愈合，其机制可能与促进成骨细胞中碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原及骨钙素的表达进而促进成骨细胞增殖和分化有关。

    接骨丹；含药血清；成骨细胞；骨折愈合

    骨折是临床最常见的多发病，具有极其复杂的修复过程，受诸多因素的影响，包括患者本身因素，医源性因素等。从微观来看还受内分泌激素、生物化学和生物物理因子的调控和微量元素的影响。临床流行病学最新调查显示约5%～10%骨折可因各种原因发生骨折迟缓愈合和不愈合，因此临床针对如何促进骨折愈合、缩短愈合时间的研究方兴未艾。骨折属于中医学“血瘀证”的范畴，而骨科疾病首载于《黄帝内经》，认为骨折耗损气血，致其运行不畅，瘀积不散，因此“活血化瘀”是治疗骨折的核心治则。

    接骨丹具有“祛瘀、生新、合骨”的作用，亦是治疗骨折的基本方剂，前期不乏研究证实接骨丹对骨折的治疗具有理想疗效，但关于接骨丹促折愈合的机理研究仍未明了，使得临床上应用接骨丹缺乏实验研究基础，因此本研究旨在观察接骨丹对体外培养的新西兰兔成骨细胞增殖分化的影响，从而为接骨丹治疗骨折提供基础数据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 10只普通级新西兰大白乳兔，雌雄各半，体重4.1～5.4 kg，平均(4.8±0.8)kg，购自军事医学科学院实验动物中心提供,动物合格证号为No.SCXK-(军)2007-004。

    1.1.2 主要试剂 接骨丹(规格10 g/包 ......