养阴活胃合剂对CAG大鼠胃黏膜细胞TLRs及相关信号转导通路的影响
胃炎,2方法,3结果,4讨论
伊 凡 何小艳 郭红梅 曾韦苹 柳 静 曾斌芳(1 新疆医科大学研究生学院,乌鲁木齐,830011;2 新疆医科大学附属中医医院,乌鲁木齐,830000;3 新疆中医学院,乌鲁木齐,830011)
养阴活胃合剂对CAG大鼠胃黏膜细胞TLRs及相关信号转导通路的影响
伊 凡1何小艳1郭红梅2曾韦苹1柳 静1曾斌芳3
(1 新疆医科大学研究生学院,乌鲁木齐,830011;2 新疆医科大学附属中医医院,乌鲁木齐,830000;3 新疆中医学院,乌鲁木齐,830011)
目的:观察养阴活胃合剂对CAG大鼠胃黏膜细胞TLRs及其信号转导通路的影响,揭示养阴活胃合剂治疗CAG的治疗途径与作用靶点,分别从分子水平、蛋白水平阐述养阴活胃合剂治疗CAG的作用机制,并通过测定炎症因子的变化情况观察养阴活胃合剂在抗炎方面的作用。方法:将实验动物随机分为6组:空白对照组、模型组、阳性药物对照组及中药低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组16只。除空白对照组常规饲养、自由进食水之外,其余5组将2 g水杨酸钠加入100 mL的30%乙醇溶液中,给大鼠灌胃,1次/d,3 mL/次,配合隔日喂食不禁水法建立大鼠萎缩性胃炎模型,模型复制成功后中药治疗低、中、高剂量组分别喂饲养阴活胃合剂水煎剂0.74 g/kg·d、1.48 g/kg·d和2.22 g/kg·d。12周后测定血清中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-β(IFN-β)诱导型一氧化氮合成酶(NOS2)四种炎症因子含量,测定TLRs及其下游转导元件mRNA及蛋白的含量。结果:养阴活胃合剂能够改善大鼠胃黏膜病理状态,使病变胃黏膜趋于正常。与空白对照组比较,各组炎症因子及TLRs及其下游信号转导元件蛋白及mRNA含量均明显升高(P1 材料与方法
1.1 实验动物 清洁级(SPF)成年雄性Wistar大鼠96只,质量150~200 g(由新疆医科大学实验动物中心提供[使用许可证号:SYXK(新)2003-0001])。
1.2 仪器 主要试剂与仪器:DAB显色试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司,批号:BD205),TRAM1(A-15):Sc-87481,Anti-TRIF Antibody(ab13810),Anti-NF-κB antibody(ab16502),TRNzol总RNA提取试剂(田根生化科技有限公司,批号DP405-2),2×Taq PCR Master Mix(田根生化科技有限公司,批号:KT201-02) ......
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