赵 雪 孔维军 麻馨月 常桂英 董长颖 杨世海

    (1 吉林农业科技学院,吉林,132101; 2 中国医学科学院药用植物研究所,北京,100193; 3 吉林农业大学,长春,130118)

    黄花败酱发状根培养体系的建立及其抑菌作用研究

    赵 雪1,2,3孔维军1麻馨月1常桂英1董长颖1杨世海2

    (1 吉林农业科技学院,吉林,132101; 2 中国医学科学院药用植物研究所,北京,100193; 3 吉林农业大学,长春,130118)

    目的:初步建立黄花败酱发状根培养体系,并考察其抑菌效果。方法:采用发根农杆菌1601、15834、A4、1000等4种G-土壤杆菌诱导黄花败酱外植体产生发状根,考察不同外植体、菌株、侵染时间、预培养和共培养时间对黄花败酱毛状根诱导率的影响,并对发状根进行PCR检测;同时采用纸片扩散法测定其抑菌效果。结果:黄花败酱茎段作为外植体,预培养和共培养48 h,发根农杆菌A4侵染8 min,MS液体培养基pH为6时添加蔗糖浓度为40 g/L时转化率和增殖量最高,提取毛状根中总黄酮的含量为9.12%。应用PCR证实A4质粒上的rolB基因片段成功转入被感染的黄花败酱发状根中。结论:建立了黄花败酱毛状根培养体系,其发状根提取液对金黄色葡萄球菌具有较好的抑制作用。

    黄花败酱;发根农杆菌;发状根;抑菌作用

    黄花败酱(PatriniascabioscaefoliaFisch)别名黄花龙芽、野共花、鹤立鸡群,为败酱科(Valerianaceae)败酱属(Patrinia)植物,根或全草入药,是我国传统常用中药之一,主产于黑龙江、河北、湖南等省[1-2]。黄花败酱草的全面研究始于20世纪60、70年代,其草内含有皂苷类、黄酮类、挥发油类等多种药用成分,其中以三萜皂苷和黄酮类为主要活性成分[3],具有清热解毒、利湿排脓,祛瘀止痛的功效[4]。临床研究表明在治疗流行性鼻腔炎、腮腺炎、慢性盆腔炎及阑尾脓肿症状等方面有很好的疗效[5]。除此之外,该草药还有解毒排脓、治疗子宫炎及产后脱宫蓄脓的功效。黄花败酱种子中的Sulfapatrinosides有效成分可用于控制艾滋病(HIV),黄花败酱提取液在延长戊巴比妥钠对小鼠的睡眠时间上也有很明显的作用[6]。随着研究的不断深入,黄花败酱草的药用价值逐渐提高,临床应用和市场需求逐渐加大。利用发根农杆菌(Agrobacteriumrhizogenes)侵染植物诱导毛状根培养技术是继离体培养技术之后的新型悬浮培养技术,可用于建立产生次生代谢产物的培养系统,具有遗传稳定性、生长迅速、合成次生代谢物能力强、易于操作控制等优点,较传统的细胞培养技术具有更广阔的应用前景[7-9] ......