胡 琦 谭小宁 余 娜 朱 沛 陈思勤 朱克俭

    (湖南省中医药研究院附属医院，长沙，410006)

    臭牡丹总黄酮介导Wnt/β-catenin信号转导诱导人肝癌细胞HepG2的凋亡

    胡琦谭小宁余娜朱沛陈思勤朱克俭

    (湖南省中医药研究院附属医院，长沙，410006)

    摘要目的：探讨臭牡丹总黄酮诱导肝癌细胞凋亡的作用及机制。方法：体外培养HepG2细胞，流式细胞术检测臭牡丹总黄酮对细胞凋亡的影响；RT-PCR法检测臭牡丹总黄酮作用于HepG2细胞48 h后对β-catenin、Tcf-4、CD44v6 mRNA表达的影响。结果：流式细胞术结果显示：随着臭牡丹总黄酮剂量的增加，细胞凋亡比例亦相应增加。PT-PCR结果显示不同剂量臭牡丹总黄酮作用下β-catenin、Tcf-4、CD44v6 mRNA的表达均降低，与对照组相比具有统计学意义。结论：臭牡丹总黄酮诱导HepG2凋亡，能下调β-catenin、Tcf-4、CD44v6基因的表达，其作用机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路并抑制其关键基因有关。

    关键词臭牡丹总黄酮；肝癌；Wnt/β-catenin信号通路；凋亡

    肝癌是我国仅次于肺癌的第2大癌症杀手。近年来中医药在我国的肝癌防治研究方面发挥着越来越重要且独特的作用。臭牡丹是根据著名中医药学家欧阳锜研究员，发掘湖南民间治疗恶性肿瘤单方，通过多年的反复临床、科研实践筛选出来并习用的一味中草药。其性平，味辛、苦，具有健脾养血、解毒散瘀之效。前期研究表明，臭牡丹具有镇痛、催眠、抑菌、抗炎及抗肿瘤的药理作用[1]。其茎叶含有大量黄酮成分，目前分离出来的黄酮类化合物有明显抗肿瘤活性[2-3]，但其抗肿瘤机制相关研究颇少。Wnt/β-catenin信号通路作为细胞信号转导系统之一，参与肿瘤发生发展的机制涉及细胞凋亡等多方面。本研究选择人肝癌细胞HepG2细胞株为实验对象，观察臭牡丹总黄酮对HepG2细胞凋亡以及对Wnt/β-catenin信号传导通路的影响，以从一定角度探讨臭牡丹总黄酮抗肝癌的具体机制。

    1材料

    1.1药物臭牡丹饮片湖南省中医药研究院附属医院中药房提供，经湖南省中医药研究院中药研究所鉴定、提取。提取采用溶剂萃取法，取臭牡丹地上部分，加入10倍量蒸馏水煮沸20 min后过滤，剩余残渣再用蒸馏水加热提取，将两次滤过液合并，浓缩后用3倍量95%乙醇静置48 h后 ......