师一民 王永强 安 辰 赵 晖 齐 放 张秋霞 陈振振 樊永平 李 明 王 蕾

    (1 首都医科大学中医药学院中医络病研究北京市重点实验室，北京，100069； 2 首都医科大学附属北京天坛医院，北京，100050)

    实验研究

    补肾益髓方及其拆方对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠脑和脊髓中p-Tau和Beta-tubulin表达的影响

    师一民1王永强1安辰1赵晖1齐放1张秋霞1陈振振1樊永平2李明1王蕾1

    (1 首都医科大学中医药学院中医络病研究北京市重点实验室，北京，100069； 2 首都医科大学附属北京天坛医院，北京，100050)

    目的：观察补肾益髓(Bu Shen Yi Sui，BSYS)方及其拆方补肾(Bu Shen，BS)和化痰活血(Hua Tan Huo Xue，HTHX)方对实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis，EAE)小鼠脑和脊髓中p-Tau和Beta-tubulin的作用。方法：C57BL/6小鼠雌性随机分为正常对照(NC)、模型(MO)、醋酸泼尼松(PA)、梓醇(CA)、BSYS、BS和HTHX组。造模当天与造模后第7天于小鼠背部两侧皮下注射抗原，即50 μg髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)35-55、完全弗氏佐剂(CFA)与结核分支杆菌(TB)混合，并在免疫当天和2 d后腹腔注射500 ng的百日咳毒素(PTX)。每天对小鼠进行灌胃，观察其体重及神经功能评分，并于造模第20 d和第40 d分别取脑和脊髓进行病理检测。采用免疫组化法检测p-Tau和beta-tubulin的表达。结果：与MO组比较，BSYS、BS和HTHX组体重与神经功能评分均出现明显上升，HE染色可观察到炎细胞显著减少，核固缩减轻，同时，BSYS、BS和HTHX方均可明显下调p-Tau表达(P1 材料与方法

    1.1实验材料

    1.1.1实验动物70只SPF级C57BL/6雌性小鼠，体质量控制在15～17 g。购于北京维通利华实验动物技术有限公司[许可证号为SCXK(京)2012-0001]。动物饲养于首都医科大学实验动物中心(许可证号SYXK(京)2010-0020)，具备独立通气笼(Individual Ventilated Cages，IVC)系统，单笼饲养，温度18～22 ℃，相对湿度40%～60%，自由接触饲料和饮水。每日上午添加饲料、更换水和垫料。所有实验均经首都医科大学伦理委员会批准。

    1.1.2实验药物BSYS方由生地黄、熟地黄、浙贝母、水蛭、全蝎、益母草等组成；BS方由生地黄、熟地黄等组成；HTHX方由浙贝母、水蛭、全蝎、益母草等组成 ......