王 焕

    (河南省济源市人民医院药剂科,济源,454650)

    榄香烯乳联合人参皂苷对卵巢癌细胞耐药株A2780/PTX的影响作用

    王焕

    (河南省济源市人民医院药剂科,济源,454650)

    目的:观察榄香烯乳联合人参皂苷方案对卵巢癌细胞耐药株A2780/PTX的影响作用。方法:采用体外培养的卵巢癌细胞耐药株A2780/PTX进行实验,随机分成4组,空白组:新鲜的全培养液;人参皂苷组:30 μg/mL人参皂苷培养液;榄香烯乳组:20 μg/mL榄香烯乳培养液;联合组:30 μg/mL人参皂苷+20 μg/mL榄香烯乳培养液。通过流式细胞仪检测细胞周期;通过MTT法检测榄香烯乳及人参皂苷单用的细胞毒作用及2者联合应用时的作用;采用Western-blot观察A2780/PTX细胞内蛋白的表达;采用激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位的变化。结果:流式细胞术检测结果显示,与人参皂苷组、榄香烯乳组及空白组比较,联合组在G0/G1期细胞有明显增加,差异有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1实验材料人卵巢癌A2780/PTX细胞购于南京凯基生物科技有限公司;人参皂苷购自天津马克生物技术有限公司(批号:41753-43-9);榄香烯乳剂注射液购自大连金港制药有限公司(批号:081152);DMEM培养液购于美国Gibco;蛋白定量试剂盒为美国Klontech公司产品;四甲基氮唑蓝(MTI7)为美国Sigma公司产品;小牛血清、DMEM培养液购于杭州四季青生物有限公司;细胞裂解液购自碧云天生物技术有限公司;HER-2兔抗人抗体及二抗均为Santa Cruz公司产品;蛋白酶抑制剂、磷酸化酶抑制剂购自南京凯基生物科技发展有限公司;紫外分光光度计、倒置显微镜购自日本TOYOBO公司;流式细胞仪购于美国Biorad公司。

    1.2细胞培养用含10%胎牛血清的DMEM培养液培养人卵巢癌A2780/PTX细胞,于37 ℃含5% CO2的空气培养箱中培养,2 d传代1次,取处于生长对数期的细胞用于实验。

    1.3实验方法

    1.3.1药物预处理及实验分组药物预处理:将卵巢癌A2780/PTX细胞以1×106个/mL的密度接种至6孔板中,于每孔加入DMEM 3 mL。人参皂苷、榄香烯乳先用DMSO溶解,然后用培养基稀释至终浓度。培养体系中人参皂苷的浓度为30 μg/mL,此时DMSO的终浓度为0.1%;榄香烯乳20 μg/mL。6 h后收集细胞悬液以1 000 r/min离心5 min收集细胞并用PBS清洗涤1遍 ......