芪参益气滴丸对糖尿病大鼠视网膜谷氨酸转运体及谷氨酰胺合成酶表达的影响
罗 钢 蔡丽英(黄石市中心医院,黄石,435000)
芪参益气滴丸对糖尿病大鼠视网膜谷氨酸转运体及谷氨酰胺合成酶表达的影响
罗钢蔡丽英
(黄石市中心医院,黄石,435000)
目的:探讨芪参益气滴丸对糖尿病大鼠视网膜谷氨酰胺合成酶及谷氨酸转运体的表达水平的影响。方法:选择维通利华实验动物研究所提供的六周龄SPF级SD大鼠80只,体重180~220 g,雄性,根据随机数字表法分为实验组(例数=70)、正常组(例数=10),进行链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ),一次性注射腹腔对胰岛β细胞进行选择性破坏,诱发实验性糖尿病;应用时由PH 4.4、0.1 mmol/L无菌的柠檬酸钠缓冲液配制为1% STZ溶液,根据大鼠体重予以65 mg/kg左下腹腔一次性注射1% STZ,正常组注射相同体积的生理盐水,72 h后应用快速血糖仪检测血糖水平;血糖水平超过16.7 mmol/L者则为糖尿病大鼠模型;随机分为对照组(多贝斯对照组)(20只)、治疗组(芪参益气滴丸组)(30只)、糖尿病模型组(模型组)(20只)、正常组(例数=10),应用RT-PCR法检测4组大鼠视网膜GFAP mRNA表达水平;应用免疫组织化学染色法(Labelled Streptavidin Biotin Method,LSAB法)检测4组视网膜的谷氨酸转运体(Glutamate/aspartate Transporter,GLAST)表达水平;应用免疫组织化学染色法(LSAB法)检测视网膜上谷氨酰胺合成酶(Glutamine Synthetase,GS)的表达水平情况。结果:对照组、模型组、治疗组的大鼠视网膜GFAP阳性表达IOD值显著低于正常组,差异有统计学意义(P1 材料与方法
1.1实验动物维通利华实验动物研究所提供的六周龄SD大鼠SPF级80只,体重180~220 g。
1.2实验药物与试剂芪参益气滴丸(天津天士力制药集团股份有限公司生产,国药准字Z20030139),羟苯磺酸钙胶囊(商品名:多贝斯,西安利君制药有限责任公司生产,国药准字H20000713);Dako公司提供的LSAB通用试剂盒,Sigma公司生产的DAB显色剂,Roche公司提供的细胞凋亡检测盒,Sigma公司提供的STZ。
1.3实验仪器Kodak公司提供的Image Plus Pro 6.0图像分析系统;SAKURA CRM-440型病理切片机,SAKURA PS-53型展片器,日本SAKURA Tissue-Tek TECTM5 SM C1-042-SO型组织包埋机 ......
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