张捷平 王晓宁 余文珍 郑燕芳 陈雪花 施 红

    (福建中医药大学中西医结合学院，福州，350122)

    石斛合剂对db/db小鼠肝胰岛素信号通路蛋白表达的影响

    张捷平 王晓宁 余文珍 郑燕芳 陈雪花 施 红

    (福建中医药大学中西医结合学院，福州，350122)

    目的：观察石斛合剂序贯治疗对db/db小鼠肝胰岛素信号通路蛋白基因表达的影响，探讨其调节血糖的分子机制。方法：选取12～14周龄雄性db/db小鼠，按空腹血糖及体质量随机分成模型组、二甲双胍组、石斛合剂序贯组(以下简称序贯组)；选db/m为正常对照组。连续灌胃给药共6个循环(54 d)。观察各组治疗后各组空腹血糖(FBG)、口服葡萄糖耐量(OGTT)、糖化血清蛋白(GSP)、血清胰岛素(Ins)、三酰甘油(TG)及胆固醇(Tch)，同时提取肝组织RNA，以逆转录PCR法检测胰岛素受体(InsR)、胰岛素受体底物1/2(IRS1/2)、PI3K mRNA表达水平变化。结果：与模型组比较，序贯组FBG、GSP和Ins显著下降(P1 材料与方法

    1.1 实验动物 SPF级db/db小鼠18只，体质量为(45.2±3.2)g；db/m小鼠6只，体质量为(26.2±2.3)g。所有小鼠均为雄性，12～14周龄。由北京大学(医学部)实验动物科学部提供(许可证号为SCXK(京)2011-0012)，饲养于福建中医药大学实验动物中心SPF级环境，自由摄食、饮水，室温20～23 ℃，空气流通，相对湿度55%～70%，12 h光照昼夜循环。

    1.2 药物 石斛合剂1方(石斛、黄芪、五味子、葛根、玄参、黄连、丹参、栀子、瓜蒌等)，石斛合剂2方(茵陈、大黄、栀子、柴胡、车前子、瞿麦等)，上述中药饮片购于福建中医药大学国医堂。以6倍体积水煎2次后过滤，滤液合并后分别浓缩至含生药量2 g/mL、1 g/mL)，二甲双胍(20 mg/mL，批号：H20023370，中美上海施贵宝制药有限公司)。

    1.3 试剂及仪器 胰岛素(insulin，Ins)放免试剂盒(批号20150320，北京市福瑞生物工程公司)，三酰甘油(triglyceride，TG)、总胆固醇(total cholesterol，Tch)、糖化血清蛋白(glycosylated serum protein，GSP)检测试剂盒(批号20150120，20150115，20150301，南京建成生物技术公司)，Trizol(批号15596026，美国Invitrogen公司)，逆转录试剂盒(批号00111863 ......