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编号:226257
温和灸皮肤神经性TRPV1启动机制及对内脏痛的效应机制研究
http://www.100md.com 2016年2月24日 世界中医药 2016年第12期
体表,温度控制,3讨论
     郑桂芝 李 晗 吴焕淦, 马晓芃 方臻臻 马 喆 周次利 施 征 刘慧荣,

    (1 上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院,上海,200437; 2 上海中医药大学上海市针灸经络研究所,上海,200030)

    温和灸皮肤神经性TRPV1启动机制及对内脏痛的效应机制研究

    郑桂芝1李 晗1吴焕淦1,2马晓芃2方臻臻1马 喆1周次利2施 征2刘慧荣1,2

    (1 上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院,上海,200437; 2 上海中医药大学上海市针灸经络研究所,上海,200030)

    目的:围绕体表神经性瞬时电位感受器香草酸亚型1(Neuronal Transient Receptor Potential Vanilloid 1,nTRPV1)研究温和灸皮肤启动机制和对内脏痛模型的镇痛效果。方法:野生型C57BL/6小鼠作为主要研究对象。于8周龄时予130 μg/mL硝基苯磺酸灌肠(Three Nitrobenzene Sulfonic Acid,TNBS)诱导慢性内脏痛模型小鼠。12周龄时,温和灸组(Moxibustion,Mox)和假温和灸组(Sham Mox)的小鼠足三里穴区接受温和灸刺激,Mox的穴区皮肤温度控制在(45±1)℃,而Sham Mox控制在(37±1)℃。借用腹部撤回反射评分(Abdominal Withdrawal Reflex,AWR)作为疼痛主要观察指标。使用神经纤维素蛋白(Protein Gene Product 9.5,PGP9.5)和TRPV1免疫荧光双标,观察艾灸对于nTRPV1的影响。同时使用TRPV1阻断剂——辣椒平(Capsazepine,CPZ),分别以高、低剂量阻断体表TRPV1,观察Mox的镇痛和体表nTRPV1的表达。另外,又分别使用坐骨神经结扎和树脂毒素(Resiniferatoxin,RTX)阻断皮下nTRPV1,研究Mox的镇痛和体表nTRPV1表达。结果:相对于Sham Mox,Mox显著改善了内脏痛模型小鼠的AWR评分(P1 材料与方法

    1.1 实验动物 7周龄野生型C57BL/6小鼠(购于上海斯莱科实验动物公司),饲养于上海中医药大学动物实验中心(温度21±1 ℃,湿度50%~70%,12 on/12 off光照循环)。小鼠购入后置于动物房适应环境1周后开始实验。

    1.2 主要试剂与仪器 清艾条(0.5 cm×10 cm,南阳艾条厂)、三硝基苯磺酸(Three nitrobenzene sulfonic acid,TNBS,美国Sigma公司)、戊巴比妥钠(德国Merck公司)、神经纤维丝蛋白抗体(Protein gene product 9.5 ......

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