戚 莉 易 韬 张建斌 常小荣 杨 玲 刘慧荣 丰晓溟 吴焕淦

    (1 上海中医药大学上海市针灸经络研究所，上海，200030； 2 上海中医药大学中医内科学E-研究院，上海，201203； 3 复旦大学附属华山医院中西医结合科，上海，200040； 4 南京中医药大学，南京，210023； 5 湖南中医药大学，长沙，410208)

    温和灸对慢性内脏痛敏模型大鼠结肠CRFR2表达的影响

    戚 莉1,2易 韬3张建斌4常小荣5杨 玲1刘慧荣1丰晓溟1吴焕淦1

    (1 上海中医药大学上海市针灸经络研究所，上海，200030； 2 上海中医药大学中医内科学E-研究院，上海，201203； 3 复旦大学附属华山医院中西医结合科，上海，200040； 4 南京中医药大学，南京，210023； 5 湖南中医药大学，长沙，410208)

    目的：观察温和灸对慢性内脏痛敏(Chronic Visceral Hyperalgesia，CVH)模型大鼠行为学及结肠组织促肾上腺皮质激素释放因子2型受体(Corticotrophin Releasing Factor Receptor 2，CRFR2)蛋白及其mRNA表达的影响。方法：采用乳鼠结直肠扩张(Colorectal Distention，CRD)刺激建立CVH大鼠模型，模型制备成功后选取双侧天枢、上巨虚穴分别进行温和灸及假灸干预，1次/d，连续7 d。全部干预结束后，以腹部撤回反射(Abdominal Withdrawl Reflex，AWR)评分作为检测大鼠内脏痛敏的行为学指标；采用免疫组织化学法、实时荧光定量PCR法观察结肠组织CRFR2蛋白及其mRNA的表达。结果：在不同强度的CRD刺激下，与正常组相比，模型大鼠AWR评分升高(P1 材料与方法

    1.1 实验动物 雄性SD(Sprague Dawley)新生大鼠(出生后5 d)，由复旦大学上海医学院实验动物中心提供。每8～10只乳鼠与母鼠同笼直到28 d，鼠乳喂养，母鼠自由饮食。3 d后，无不良反应乳鼠，纳入实验。

    1.2 主要试剂与仪器 特制细艾条(南阳汉医艾绒有限责任公司)，组织脱水机(TP1020型，德国徕卡公司)，石蜡包埋机(EG1160)，组织切片机(RM2235型，德国徕卡公司)，封片机(GV5030型，德国徕卡公司)，Rabbit anti-CRFR2(Abcam)，光学显微镜(日本OLYMPUS公司)，Canon PowerShot A640(日本佳能公司)，Gene Cycler PCR扩增仪(美国伯乐Bio-rad公司) ......