摘要目的：对桃仁和苦杏仁进行分子鉴定研究，建立基于ITS序列位点特异性的PCR鉴定方法。方法：收集桃仁、苦杏仁样品，提取基因组总DNA，用ITS通用引物进行测序，通过BioEdit软件进行序列比对，根据特异位点设计鉴别引物进行特异性PCR反应，并对PCR反应条件进行了优化。结果：基于ITS序列设计的特异性鉴别引物G47可以用于桃仁和苦杏仁的鉴别研究，在位点特异性PCR反应条件考察中，25 μL反应体系DNA模板用量适宜范围为005～1 ng，退火温度在59 ℃时特异性最佳，实验建立的方法对不同DNA聚合酶和PCR仪均具有普适性。结论：该研究设计的位点特异性引物在一定条件下的PCR反应中，桃仁能够扩增出333 bp清晰条带，而苦杏仁没有该条带，从而实现了桃仁与苦杏仁的快速、准确鉴别。

    关键词桃仁；苦杏仁；ITS；位点特异性PCR；分子鉴定

    Identification of Persicae Semen and Armeniacae Semen Amarum by PCR Amplification of Specific Alleles Based on ITS Sequences

    Gao Linhui1 ......