174血清抗衰老蛋白(Klotho)水平变化

    采用Western blotting对患者治疗前后血清抗衰老蛋白水平进行检测，具体过程：收集蛋白样品：抽取空腹外周肘静脉血10 mL，低温高速离心后提取血清，加入人淋巴细胞分离液将单核细胞分离出来，加IP细胞裂解液进行细胞裂解，再次低温高速分离，收集蛋白样品，并用BCA试剂盒进行蛋白浓度测定，并计算上样量。电泳、转膜：事先准备SDSPAGE凝胶，根据计算好的上样量将样本加入凝胶中，进行电泳，电压设置在100 V，然后设定电泳时间为90 min，利用BioRad转膜装置将蛋白转膜至PVDF膜。3)封闭：转膜完毕后，把蛋白膜放置到预先准备好的，漂洗1 min，以洗去膜上的转膜液。4)抗孵育：等封闭后加入1∶500稀释的一抗(Klotho)及内参抗体(βacting，1∶3 000)室温孵育2 h，5)二抗孵育：一抗孵育后加入辣根过氧化酶HRP二抗，最后进行显影、拍照、统计分析。

    18统计学方法

    采用SPSS 160统计软件对本研究的相关数据进行分析，计数资料以率表示，使用χ2检验，计量资料均以(±s)表示，组间比较则使用t检验 ......