补益心脾对产后抑郁症大鼠模型Th1/Th2平衡细胞免疫调节作用的影响(3)
造模后1、2、4周观察模型组与正常组、假手术组行为学变化,明确造模成功;同时观察中药组、西药组对大鼠行为学变化的影响。2)应用流式细胞术检测Th1、Th2的细胞比例:在麻醉的情况下,取4 mL新鲜大鼠腹主动脉血液,离心弃血浆后再加磷酸盐缓冲液(PBS)2 mL,混匀;取15 mL的离心管并加入5 mL淋巴细胞分离液,再以2 500 r/min速度离心20 min,吸取淋巴细胞层,使用RPMI-1640培养基洗涤2次,弃掉上清液;然后取外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cells,PBMC)悬液100 μL;在每管加入Per CP抗大鼠CD4 2 μL,混匀后避光孵育30 min;把1×Cell Activation Cocktail(with Brefeldin A)4 μL和RPMI-1640培养基100 μL放入5%CO2,37 ℃的恒温箱中培养6 h;再入Cell Staining Buffer ......
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