2)免疫组织化学检测：取未染色的切片进行脱蜡、脱水、修复，分别用需检测蛋白的一抗和相应的二抗进行孵育，用DAB显色、苏木精复染后，常规脱水、中性树脂封片并在光镜下观察，选取同一层级支气管采集图像，应用Image-pro Plus 6.0医学图像分析软件测定各组大鼠肺组织内Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Collagen Ⅲ)的平均吸光度值(MOD)。

    3)蛋白质印迹法检测：取出冻存的肺组织，用BCA法测定目的蛋白浓度，SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质，转移至聚偏二氟乙烯膜(PVDF膜)，置于5%的脱脂奶粉封闭液中室温封闭1 h，加入需检测蛋白的一抗，4 ℃孵育过夜，洗膜后加入相应的二抗，室温摇床孵育1 h，取出PVDF膜用ECL超敏发光液曝光。采用Quantity One软件分析图像，以目的蛋白与β-actin的灰度比值作为目的蛋白的相对表达量。

    4)RT-PCR检测：按照试剂盒说明，以Trizol法提取大鼠肺组织总RNA，并测定RNA浓度及纯度 ......