基于线粒体功能特性研究健脾益气摄血方调控ITP乏力机制
南凌杉 张雅月 王佳 丁晓庆 郭明 谌海燕 刘军霞 李玲 陈信义 郎海燕


摘要 目的:驗证健脾益气摄血方缓解ITP乏力症状与改善线粒体功能的相关性。方法:通过被动免疫造模法建立ITP小鼠模型,分为正常组、模型组、强的松组、健脾益气摄血(JPYQSX)中、高剂量组。通过光谱法检测小鼠脾脏组织活性氧含量;通过实时荧光定量PCR(qPCR)检测线粒体DNA相对拷贝数;通过免疫荧光法检测结肠ATP含量。结果:与正常组比较,模型组(P0.05),结肠组织ATP含量均显著升高(P0.05)。
小鼠结肠组织ATP含量:由于肝脾等其他脏器裂解之后含有大量血细胞,上清颜色偏红,会引起发光法测量误差过大,故最终选用结肠组织检测。首先以ATP标准溶液检测0.01、0.03、0.1、0.3、1、3、和10 μmol/L这几个浓度,制作标准曲线,测量得到样品相对发光值。样本检测值见表3,ITP模型小鼠结肠组织ATP检测标准曲线见图4,各组小鼠结肠ATP含量比较见图5。
从图5结果可以看出,与正常组比较,模型组、强的松组和健脾益气摄血中剂量组小鼠结肠组织ATP含量明显下调,差异有统计学意义(P0.05)。
3 讨论
健脾益气摄血方对脾脏组织ROS水平影响:活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)是线粒体呼吸链(Respiratory Chain,RC)氧化磷酸化过程中电子泄露的副产物,在病理条件下,许多因素均会引起ROS生成增多,导致脂质过氧化作用而破坏线粒体膜结构,从而导致ATP生成减少和氧化磷酸化功能受损,氧化磷酸化功能受损又会进一步促进ROS生成,从而形成了自体循环链式线粒体功能障碍[4-6]。多种疾病所伴随的乏力症状主要表现为运动耐力下降的疲劳感。有研究表明,这种疲劳感与肌肉组织中线粒体氧化磷酸化功能减弱有关[7-9] ......
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