王元元 刘晓鹰 李 卉 罗接红 陈 畅 王林群 张雪荣 霍文丽 陈雪莲

    (1 湖北中医药大学中医临床学院，武汉，430065； 2 湖北省中医院/湖北中医药大学附属医院/湖北省中医药研究院，武汉，430061； 3 武汉市儿童福利院，武汉，430061)

    儿童血尿涉及多种疾病，其病理改变主要为IgA肾病。研究发现45.25%病理表现为Ⅲ～Ⅴ级，15%～40%可发展为终末期肾衰竭[1]。小儿血尿是否需要治疗以及何时治疗，中西医认识各异。西医常建议长期随访，待出现蛋白尿或肾脏病理改变到一定程度再予以治疗[2]。中医多数医家认为湿热伤络是其早期病机，主张积极治疗，但因无临床症状而单以尿检为用药依据，缺乏中医证的微观指标[3]。如何准确选择小儿血尿的治疗时机，是临床中、西医都不可回避的难题。目前公认肾活检是肾脏疾病诊断金指标，但因有创且存在并发症，受医疗及患者自身条件限制，而重复活检更难被接受。所以临床亟须一类理想的指标，既敏感精确、无创易采集，又能动态监测肾脏早期病理变化，即使在不做肾活检前提下，也能提示病情是否进入肾脏病变的进展阶段。这样，临床医师确定对小儿血尿治疗的时机时就有了参考。代谢组学属于系统生物学，可使人体生理病理状态精确地呈现出来，同时还体现出了动态性和整体性的特点，其和中医整体观以及辨证观相吻合[4]。本课题拟运用代谢组学技术，动态监测模型大鼠不同时间点的代谢物，并与病情、肾组织病理、细胞因子等指标的变化规律相应对，找出与中医血尿“湿热证”相关联的微观指征，为下一步把握本病的干预时间点奠定实验基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物 初筛76只健康雄性SD大鼠，3周龄，体质量(90±20)g，购自湖北省预防科学院实验动物中心。喂养大鼠的饲料来自于湖北省实验动物中心饲料加工厂。在提供无特定病原体(Specific Pathogen Free,SPF)级别实验动物研究中心场地的湖北中医药大学饲养。屏障环境条件设置：光照周期为昼夜12 h交替，室温控制在23～25 ℃，湿度45%～65%，造模期间，需要在人工气候箱中对温度和湿度进行调节。本研究通过伦理委员会审批。

    1.1.2 试剂与仪器 牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)(西格玛奥德里奇公司，美国，批号：20160730)；脂多糖(西格玛奥德里奇公司，美国，批号：20160830)；四氯化碳(CCl4)(武汉同兴生物科技有限公司，批号：10654251)；二甲苯(国药集团，批号：10023418)；大鼠转化生长因子-β1酶联免疫吸附测定试剂盒(欣博盛生物科技有限公司 ......