宋文婷 丁 昭 苗 兰 孙明谦 尹春园 曹 慧 史 跃 马彦雷 李 磊 刘建勋

    (1 中国中医科学院西苑医院基础医学研究所,北京市中药药理重点研究室,北京,100091; 2 莱顿大学莱顿药物研究中心,莱顿,2333CD)

    中风是严重危害中国国民健康的重大慢性非传染性疾病,具有致残率高和死亡率高的特点[1]。60%的中风患者为缺血性中风[2]。中医认为,气能推动血液运行,气机调畅,则血液能够正常运行。但在气虚状态下,气无力推动血行,形成瘀滞[3]。临床上常用益气活血法治疗气虚血瘀型中风[4]。补阳还五汤由黄芪、川芎、赤芍、红花、桃仁、当归、地龙等7味传统中药组成[5],对于气虚血瘀型中风有较好治疗作用[6-7]。

    代谢组学是研究生物体受到内外刺激后,体内小分子代谢物变化的一项技术,它反映了多种因素作用的终点效应,是各种因素效应的综合体现[8]。代谢组学的整体性和系统性与中医药的整体性思维相吻合。本实验观察补阳还五汤对气虚血瘀型脑缺血大鼠的治疗作用,再借助代谢组学技术,对大鼠血清中的内源性小分子代谢物进行检测和通路分析,探讨给药前后大鼠机体代谢产物的动态变化,以期为深入探索其作用机制提供依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物 雄性斯泼累格·多雷(Sprague Dawley,SD)大鼠30只,无特定病原体(Specific Pathogen Free,SPF)级,7周龄,体质量200～220 g,购于维通利华实验动物技术有限公司,动物合格证号SCXK(京)2016-0006。饲养于中国中医科学院西苑医院SPF级实验动物中心,温度23～25 ℃,湿度50%～70%,12 h交替照明,大鼠5只一笼,可自由饮水摄食。本研究经中国中医科学院西苑医院伦理委员会审批通过(伦理审批号:2018XLC003-2)。

    1.1.2 药物 黄芪配方颗粒(批号:1812002C),川芎配方颗粒(批号:1812001S),赤芍配方颗粒(批号:1812005S),红花配方颗粒(批号:1812001S),桃仁配方颗粒(批号:1812004S),地龙配方颗粒(批号:1812001S),当归尾配方颗粒(批号:1812003S),均购自华润三九有限公司。

    1.1.3 试剂与仪器 乙腈(色谱纯,Fisher公司,美国,批号:F19M9J202),甲醇(色谱纯,Fisher公司,美国,批号:198267),甲酸(分析纯,西陇化工股份有限公司,批号:101117),纯净水(中国娃哈哈有限公司,批号:20170317),二甲基亚砜(分析纯,西陇化工股份有限公司,批号:111115),荧光微球(UVPMS-BY2,Cospheric公司,美国,批号:100309-7),医用水合氯醛(上海源叶生物有限公司,批号:Z16J10Y80098),大鼠血栓素B2(Thromboxane,B2,TXB2)酶联免疫检测试剂盒(南京建成生物工程研究所,批号:20191016),大鼠6-酮前列腺素F1α(6-keto-prostaglandin F1α,6-keto-PGF1α)酶联免疫检测试剂盒(南京建成生物工程研究所,批号:20191016),右旋糖酐D40(大连美仑生物,批号:M1001A),API-TOF参比质量溶液试剂盒[包含hexakis(1H,1H,3H-tetrafluoropropoxy)phosphazine和7-purine](Agilent公司,美国,批号:LB97178),Agilent高效液相色谱仪(Agilent公司,美国,型号:1200),Agilent Q-TOF质谱仪(Agilent公司,美国,型号:6520),高速离心机(Hettich公司,德国,型号:MIKRO 220 R),超声波破碎仪(Sonics公司,美国,型号:VCX150) ......