屈凌芸 薛 蓉 宫静雯 张玮烨 季 徳 毛春芹 郭志俊 高 波 胡 雨 陆兔林

    (1 南京中医药大学药学院,南京,210023; 2 华润三九医药股份有限公司,深圳,518110; 3 安徽华润金蟾药业股份有限公司,淮北,235000)

    附子为毛茛科植物乌头AconitumcarmichaeliiDebx.的子根加工品,具有回阳救逆、补火助阳、散寒止痛的功效[1]。附子有大毒,其毒性主要来自生物碱成分,黑顺片为附子的主要炮制品,临床应用广泛,其质量优劣直接关联临床安全性与有效性,严格控制其质量标准,对提高饮片质量、保证其安全有效使用具有重要意义[2]。然而黑顺片产地较多,炮制工艺步骤及其机制复杂,涉及毒效成分转化,现行《中华人民共和国药典》及各省市炮制规范未能全面反映其质量内涵。

    质量标志物(Quality Marker,Q-Marker)理论由刘昌孝院士于2016年提出[3],现已得到快速发展和完善,如从药材-饮片-制剂进行系统探索[4],从“性-效-物”三元关系和作用机制进行研究[5],基于效-毒同时入手的Q-Marker研究策略等[6],黑顺片毒性虽较附子已大幅降低,但其使用限量仍不明确,有产生不良反应的风险,Q-Marker的研究,有助于建立药效-毒性-证候关联性评价,全面反映毒性中药的生物效应。指纹图谱结合化学模式识别可对数据信息进行矩阵式整合,描述药材整体化学特征的同时,反映质量差异,可在一定程度上区分药材的真伪优劣,对质量进行评价[7]。网络药理学基于系统生物学理论,从基因、蛋白等不同水平对生物学事件进行研究,其整体性与系统性特点和中医药整体观思想不谋而合,可通过构建药物靶点之间相互作用的生物网络,快速预测中药成分的潜在作用靶点和通路,并利用分子对接技术进行验证,为其机制研究奠定基础[8]。基于此,本研究收集大批量黑顺片样品,建立其化学成分的高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)指纹图谱,结合化学模式识别整体评价质量,并进一步结合网络药理学,旨在为黑顺片的质量控制和后续开发提供更为全面和可资借鉴的参考。

    1 仪器与试药

    1.1 仪器 Agilent Technologies 1200 Series全自动高效液相色谱仪(美国安捷伦科技有限公司,美国,货号:脱气机G1322A;二元泵G1312B;自动进样器G1367D;柱温箱G1316B;检测器G1315C);依利特SinoChrom ODS-BP色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)(大连依利特分析仪器有限公司,柱号:E2020350);FA1104N型电子分析天平(上海菁海仪器有限公司,型号:y201209056);KQ-500B型超声波清洗机(昆山市超声仪器有限公司,货号:2018907000);DHG-9140A型电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司,货号:L-309435);旋转蒸发仪(南京科尔仪器设备有限公司,货号:1903023);循环水真空泵(巩义市予华仪器有限责任公司,货号:31931961586);TGL-16GB高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂,货号:75002445);Milli-Q Integral纯水/超纯水一体化系统(Millipore,美国,货号:00071625) ......