刺槐素通过核因子κB信号通路抑制脂多糖诱导的巨噬细胞损伤
货号,抗炎,1材料与方法,2结果,3讨论
补 娟 史 深 叶勒丹·马汉 王兆霞 周 玲(1 新疆维吾尔自治区人民医院医学研究与转化中心,乌鲁木齐,830001; 2 新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心消毒与感染控制中心,乌鲁木齐,830002)
炎症是一种机体适应性防御反应,但长期过度的炎症会对身体产生有害影响,引起一系列疾病如糖尿病、哮喘和类风湿性关节炎等,在严重情况下,甚至威胁人类生命[1-4]。因此,研究安全有效的抗炎药物具有重要的意义。
核因子κB是炎症反应中的重要信号通路,激活核因子κB可诱导如白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(Inducible Nitric Oxide Synthase,iNOS)、环氧合酶2(Cyclooxygenase-2,COX-2)等炎症介质的表达[5],阻断核因子κB的活化,可以抑制炎症介质的表达,发挥抗炎作用。因此,抑制核因子κB信号通路是开发抗炎药物的重要靶点。
刺槐素(Acacetin)是一种天然黄酮类药物,可从多种植物中提取获得,具有多种药理作用[6]。近年来研究发现,刺槐素可以抑制炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6等的表达,对炎症疾病如支气管炎、哮喘、肺损伤、肠炎等具有保护作用,但是刺槐素的抗炎作用机制还不明确[7-10]。因此我们用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激小鼠骨髓巨噬细胞,研究刺槐素是否通过抑制核因子κB信号通路发挥抗炎作用。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物与细胞 采用6~8周C57BL/6J小鼠原代骨髓巨噬细胞。小鼠由新疆医科大学提供(许可证号:SCXK(新)2018-0002;伦理批号:KY2020041050),饲养在通风良好、温度、湿度适宜的环境中,自由饮水及进食。分离骨髓巨噬细胞,加入含10%胎牛血清(Fatal Bovine Serum,FBS)及1%双抗的杜氏改良培养基(Dulbecco′s Modification of Eagle′s Medium,DMEM)(高糖)培养基培养7~8 d,细胞生长汇合至80%后进行实验。
1.1.2 药物 刺槐素(sigma公司,美国,货号:00017,批号:BCBT8459,二甲基亚砜(Dimethylsulfoxide,DMSO)配置为10 mmol/L的母液,用于稀释成不同浓度的工作液) ......
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