刘泽坤 贺小芳 洪 颖 盛丽莉 李后开

    (上海中医药大学中药学院,上海,201203)

    衰老是随着时间进行的整体功能的退行性变化,具有累积性、普遍性、渐进性的特点。在衰老过程中,机体功能和代谢会发生衰退,与人类疾病息息相关。衰老是大多数慢性疾病,包括心脑血管疾病、骨质疏松症、癌症及神经退行性疾病等的主要危险因素[1-4]。由于衰老是一个极其复杂的全面性变化,涉及多器官多系统,并且存在个体差异和脏器特异性[5],已成为当今社会严峻的医学问题。随着人口老龄化的进一步加剧,衰老相关疾病涌现为社会以及经济发展带来了很大负担。因此,减缓衰老或者促进“健康老龄化”成为当今社会亟待解决的问题。

    中医药历史源远流长,中药在抗衰老方面也积累了大量实践经验,其所应用的抗衰老方剂以及用药规律也为我们现代抗衰老中药的药理研究奠定了基础。衰老常表现为脾肾不足、气血亏虚、阴阳虚损等身体虚亏的现象,在《医门法律》也有云：“老衰久病,补益为先。”山药作为具有代表性的补气类药食同源中药,其性温味甘,归脾、胃、肺经,具有补脾养胃,生津益肺,补肾涩精的功效[6],在《神农本草经》上就记载其具有“补虚赢,益气力,久服耳目聪明,轻身延年”的作用。现代药理学研究表明,山药具有多种活性成分,而多糖是其主要的活性成分。目前已有研究表明山药多糖(Chinese Yam Polysaccharides,CYP)具有抗氧化[7]、降血脂[8]、抗肿瘤[9]、调节免疫[10-11]等多种药理活性。然而山药多糖延缓自然衰老的药理活性尚无研究报道。

    秀丽隐杆线虫因其虫体小、世代和生命周期较短、基因组完全测序以及与人类基因的同源性高等优点,已逐渐成为衰老和药物筛选研究的中的重要动物模型[12-14]。因此,本研究将基于秀丽隐杆线虫模型对山药多糖的抗衰老药理活性及其作用机制进行探究,为中药抗衰老药理作用机制研究提供思路和示范。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 虫株及菌株 野生型秀丽隐杆线虫N2(CaenorhabditiselegansBristol N2)批号：3190712、大肠杆菌OP50(E.coli)批号：29021,购自福建上源生物科技有限公司。

    1.1.2 药物 山药多糖(上海源叶生物有限公司,批号：S24912)。

    1.1.3 试剂与仪器 琼脂粉(OXOID公司,英国,批号：LP0011);蛋白胨(BBI公司,以色列,批号：A100636-0100);氢氧化钠(分析纯)、氯化钠(分析纯)、无水氯化钙(分析纯)、七水合硫酸镁(分析纯)、磷酸二氢钾(分析纯)、磷酸氢二钾(分析纯)、胆固醇(分析纯)(国药集团化学试剂有限公司,批号分别为：10019718、10019318、10005861、10013018、10017618、20032118、69008214);总超氧化物歧化酶测定试剂盒、过氧化氢酶测定试剂盒(南京建成生物工程研究所,批号分别为A001-3-2、A007-1-1);2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯(H2DCFDA)(SIGMA公司,德国,批号：D6683);琼脂糖(Amresco公司,美国,批号：N605)生化培养箱(上海一恒科学仪器有限公司,型号：LRH-70);酶标仪(瑞士TECAN,瑞士,型号：SPARK 10M);磁力搅拌仪(上海思乐仪器,型号：S10-2);体视显微镜(麦克迪奥科技有限公司,型号：SMZ171TLED);恒温摇床(HASUC,型号：HS-200B);低温高速离心机(Eppendorf公司,德国,型号：5810R);倒置荧光显微镜系统(Leica,德国,型号：DMi8 M/C/A) ......