吴 丹，滕伟禹

    (中国医科大学附属第一医院神经内科，辽宁沈阳 110001)

    脑出血是神经系统常见病，出血后继发性损害导致的神经细胞死亡具有重要临床意义，细胞凋亡(apoptosis)作为一种基因调控的细胞死亡方式可能为其中的一个重要环节。陈吉相等[1]研究发现，假手术组偶见凋亡细胞，表明正常脑组织一般不发生细胞凋亡；脑出血后凋亡细胞数明显增多，据此认为，细胞凋亡是脑出血周围组织损伤的一个标志，在一定程度上反映了其受损伤的程度。核因子-κB(nuclear factor kappa B，NF-κB)是一种广泛存在、功能多样的核转录因子，参与多种炎症相关基因的表达和调控[2]。近年来的研究显示，NF-κB在中枢神经系统中广泛存在，可见于大脑皮质、海马和小脑突触，神经元、神经胶质细胞与血管内皮细胞中均有表达[3]。目前关于脑出血后血肿周围组织NF-κB表达的研究甚少。本实验应用立体定向技术，将自体不凝血注入大鼠尾状核制备脑出血模型，用TUNEL染色观察神经细胞凋亡，用免疫组化染色观察NF-κB的表达，并初步探讨脑出血后神经细胞凋亡与NF-κB表达的关系。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物及分组

    健康雄性SD大鼠45只，体重250～300 g，由中国医科大学实验动物中心提供。将大鼠随机分为脑出血组和假手术组，分别按6 h、1 d、3 d、7 d分为4个亚组，每组5只；另设对照组5只。

    1.1.2 试剂与器材

    NF-κB/p65兔抗鼠多克隆抗体、即用型SABC免疫组化试剂盒、细胞凋亡检测试剂盒均购自武汉博士德生物工程有限公司；动物头颅立体定位仪(SN-2，NARISHIGHE，日本)；微量注射器(上海激光医学仪器厂)；电子分析天平(BP211D，赛多利斯，德国)；OLYMPUS光学显微镜(日本)；图像分析仪(Metamorph Image System V4.6 VIC ......