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编号:1610171
粪便中小肠结肠炎耶尔森菌PCR检测方法的建立
http://www.100md.com 2010年11月11日 中国医药导报 2010年第5期
致病性,1实验方法,2结果,3讨论
     段丽莉

    (吉林省吉林市疾病预防控制中心微生物科,吉林吉林 132001)

    粪便中小肠结肠炎耶尔森菌PCR检测方法的建立

    段丽莉

    (吉林省吉林市疾病预防控制中心微生物科,吉林吉林 132001)

    小肠结肠炎耶尔森菌是一种人畜共患的病原菌。它在自然界中广泛分布,包括人、猪、牛等哺乳动物,禽类的排泄物,蜗牛等冷血动物,昆虫,未处理的冷水,污水,肉,乳制品,蛋制品,水产品和冰激凌。所致疾病主要有胃肠炎型和肠道外型。我科应用PCR方法检测小肠结肠炎耶尔森菌,及时发现患者和带菌者,为流行病学提供实验室依据,及时控制传染源,为预防疾病起重要作用。

    小肠结肠炎耶尔森菌;PCR检测方法;病原菌

    小肠结肠炎耶尔森菌所致疾病在世界上广泛分布,但多集中在寒冷地区,在我国东北地区小肠结肠炎耶尔森菌各血清型的分布亦较广泛。本菌可感染人类以及多种动物,包括家畜、兽类、禽类、鸟类和昆虫,并通过排泄物和污染的水、食品传播。

    1 实验方法

    1.1 试剂

    干燥培养基(北京陆桥生物技术有限公司);生物梅里埃API20E生化条;诊断血清。

    1.2 仪器

    美国BIO-PCR仪;Thermo生物安全柜;离心机。

    1.3 样品采集

    采集急性期、用药前采集患者新鲜粪便标本8例,每份2~5 g,放入Cary-Blair半固体保存培养基中,4℃冷藏运送至实验室。

    1.4 操作

    1.4.1 增菌

    取1 g粪便接种于10 ml改良PBS培养基上,置于4℃冷增菌10~20 d。在冷增菌的第7、14、21天划线接种于耶尔森选择性平板、麦康凯平板,25℃培养24 h。增菌管内液体量较大 ......

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