张 涛 ，董子明，熊建荣，刘学进

    (1.河南省平顶山煤业集团总医院泌尿外科，河南平顶山 467000；2.郑州大学基础医学院病理生理教研室，河南郑州 450052)

    人类线粒体DNA(mitochondrialDNA，mtDNA)是由16569个碱基对组成的双链闭环结构，编码与氧化磷酸化相关的2种rRNA、22 种 tRNA 和 13 种蛋白多肽基因[1]。nt16024～nt16569、nt1～nt575的非编码区共有1120碱基对，称为控制区(control region，D-loop)，其中含有重链复制起点和启动子等重要基因，调控mtDNA的复制和转录[2]。近年的研究发现，在肿瘤细胞和衰老的组织细胞中，存在mtDNA的突变。因此，mtDNA尤其是D-loop的突变正逐渐成为肿瘤和老年病研究者关注的热点[3]。本文旨在探讨良性前列腺增生(BPH)细胞mtDNA控制区的突变及其意义。

    1 对象与方法

    1.1 研究对象

    随机选择我院2004年5月～2005年2月行开放手术切除和电切除的BPH患者22例，年龄54～86岁，平均70岁；6例合并高血压病、冠心病，2例合并糖尿病，2例合并肺结核。 切除的前列腺重 25～225 g，平均(63.0±40.2) g，均经病理检查证实为BPH。每个患者无菌条件下留取0.1 g BPH标本1份于液氮中保存备检。同时每个患者抽取静脉血3 ml，分离出淋巴细胞于液氮中保存备检。对照组为本地正常成年人10例，年龄 23～35岁，平均 28岁，前列腺重均<20 g，病理检查证实为正常前列腺。每人取0.1 g前列腺组织1份于液氮中保存备检。

    1.2 材料

    引物：MT-DNA扩增引物，参照GenBank J01415序列设计 2 对引物，MTP1：5'-CAT TAG CAC CCA AAG CTA AG-3'(15981～16000)；MTP2：5'-TAG GCT TTA TGA CCC TGA AG-3'(16530～16511)，扩增长度 550 bp；MTP3：5'-GCT AAA GTG AAC TGT ATC CG-3'(16477～16496)；MTP4：5'-TGG GGT GAT GTG AGC CCG TC-3'(622～641)，扩增长度734 bp；克隆鉴定引物 ......