降钙素受体在骨转移瘤中的表达水平及意义
骨组织,组织化学,成骨,1资料与方法,1一般资料,2实验仪器及试剂,3方法,2结果,3讨论
韩 枫(河南省商丘市第一人民医院骨科,河南商丘 476100)
骨转移瘤已经成为成年人中发病率最高的骨恶性肿瘤[1],骨转移瘤原发疾病多为乳腺癌、前列腺癌及肺癌等,随病情进展常会引起病理性骨折、顽固性疼痛、高钙血症及神经压迫等并发症,严重降低了患者的生活质量。本文探讨降钙素受体(calcitonin receptor,CTR)在骨转移瘤中的表达情况,并探讨其相关性及表达意义,期望能为临床应用降钙素(calcitonin,CT)治疗骨转移瘤提供理论基础和依据,现报道如下:
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2008年1月~2010年12月在我科确诊后行手术切除的骨转移瘤标本18例,同时搜集完整资料(包括患者的基本情况、实验室检查、影像学资料和病理诊断)。18例患者,其中,男性8例,女性10例;年龄35~73岁,平均57岁。肿瘤转移部位,脊柱11例(颈椎1例,胸椎5例,腰椎4例,骶椎1例),骨盆4例,股骨近端2例,股骨远端1例。根据X线表现将18例标本分为两组:成骨表现组4例,溶骨表现组14例。所有患者术后经病理确诊均为骨转移瘤,其中,12例发现原发病灶(肺癌4例,乳腺癌3例,肾癌2例,甲状腺癌1例,前列腺癌1例,胃癌1例),6例经全身检查未发现原发灶。同时选取我科在脊柱手术中切除的多余的正常棘突10例,设为对照组,其中,男性6例,女性4例;年龄35~65岁,平均50岁。取棘突部位:颈椎3例,胸椎3例,腰椎4例。
1.2 实验仪器及试剂
电热恒温干燥箱(上海跃进医疗仪器厂),超低温冰箱(青岛海尔集团公司),倒置相差显微镜(日本Olympus公司),GT16-3A离心机(北京时代北利离心机有限公司),切片机(德国Leitz公司),降钙素受体鼠抗人单克隆抗体(美国Santa Cruz公司),S-P免疫组化染色试剂盒(北京中山金桥生物技术有限公司),PBS缓冲液,抗原修复液。
1.3 方法
1.3.1 取材包埋 切除的标本均置于10%福尔马林溶液中固定15~20 h,然后放入5%硝酸银溶液中脱钙 48~72 h,此时用普通注射器针头即可刺透骨质,然后在自来水下连续冲洗72 h。梯度酒精脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,65℃浸蜡,制成蜡块后放入-4℃冰箱中。
1.3.2 连续切片 切片机以4 μm厚度对蜡块连续切片,贴于载玻片上,捞片后置60℃烤箱30~60 min ......
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