刘 嘉，梁新华，焦 炎

    (山西医科大学法医学院，山西太原 030001)

    小鼠胃和阑尾组织中h-CD降解规律与死亡时间的相关性研究

    刘 嘉，梁新华，焦 炎

    (山西医科大学法医学院，山西太原 030001)

    目的：观察小鼠死亡后不同时间胃和阑尾组织中h-CD含量的变化，探讨不同温度条件下h-CD的降解规律与死亡时间的关系及其组织差异性。方法：选取72只健康成年昆明小鼠，采用机械性窒息致死后，随机分为两组，分别置于4℃冰箱和25℃人工气候箱中，并于死后0、24、48、72、96、120 h提取胃及阑尾组织，采用免疫印记及计算机图像分析技术检测上述组织中h-CD的含量，应用SPSS 16.0软件对数据进行统计学分析。结果：①h-CD的含量随死亡时间的延长而降低，与死亡时间具有相关性；②不同温度条件下，胃和阑尾组织中h-CD的降解速度均存在明显差异(P<0.05)，h-CD在25℃组降解速度快于4℃组(P<0.05)；③h-CD的降解速度在胃和阑尾组织中存在组织差异性，在阑尾组织中的降解速度较快(P<0.05)。结论：h-CD的含量随死亡时间延长而降低，其降解速度受环境温度影响，温度升高，降解速度加快，且胃和阑尾组织中h-CD的降解速度具有组织差异性，其在阑尾组织中的降解速度快于胃组织中的降解速度。

    法医病理学；重型钙调蛋白结合蛋白；死亡时间；免疫印记

    机体死亡后，发挥重要生命功能的蛋白质也会随之发生降解。蛋白质的降解不仅受蛋白酶的作用，而且受尸体所处环境温度的影响[1]。本实验应用免疫印记法，观察小鼠死亡后不同温度条件下胃和阑尾组织中重型钙调蛋白结合蛋白(h-CD)的降解规律，为死亡时间的推断提供有效的法医学依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物分组及制备

    本研究选用实验动物已获得本校伦理委员会的同意。选取72只健康成年昆明小鼠，雌雄不限，体重(30±5)g(由山西医科大学实验动物中心提供)。采用机械性窒息方式致死后随机分为低温组和高温组，每组36只，分别放置于4℃冰箱和25℃人工气候箱中，再依据死亡时间将两组分别再分为对照组、死后 24、48、72、96、120 h 组 6 个亚组，每组 6 只。

    1.2 免疫印记检测

    分别称取100 mg胃和阑尾组织，加入1 ml裂解液(RIAP)和10 μmol/L蛋白酶抑制剂(PMSF)。加入适量液氮，在研钵中充分研磨。 将组织匀浆后抽取500 μl，4℃ 12 000×g离心30 min ......