尹 楠，茹 峰，王东文

    山西医科大学第一医院泌尿外科，山西太原 030001

    输尿管部分梗阻后平滑肌细胞中游离Ca2+浓度改变

    尹 楠，茹 峰，王东文*

    山西医科大学第一医院泌尿外科，山西太原 030001

    目的：测定大鼠单侧部分输尿管梗阻后输尿管平滑肌细胞中游离Ca2+浓度改变。方法：将Wistar雄性大鼠80只随机分为4组：8周PUUO组20只，16周PUUO组20只，同期对照组各20只。PUUO组采用将大鼠左侧上12段输尿管包埋入腰大肌造成单侧输尿管部分梗阻的动物模型，对照组仅分离左侧输尿管。成模后分别于8周和16周分离取出输尿管，分离单个输尿管平滑肌细胞应用Fura-2/AM荧光探针负载检测输尿管平滑肌细胞中游离Ca2+的浓度。结果：输尿管平滑肌静态细胞内Ca2+荧光比值测定结果显示：8周的PUUO大鼠组与对照组大鼠之间细胞内游离Ca2+浓度的差异无统计学意义，而16周的PUUO大鼠组细胞内游离Ca2+的浓度显著升高，且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：细胞内钙超载是输尿管梗阻后平滑肌功能损害病理过程的重要原因，但是发生较晚，可能在输尿管部分梗阻后期起着重要作用。

    单侧输尿管部分梗阻(PUUO)；输尿管平滑肌；细胞内钙离子

    钙超载通过损伤细胞膜和线粒体，从而导致了细胞不可逆转死亡。钙离子作为胞内重要的第二信使，是生存与死亡信号，几乎我们所有的生理活动都受到钙离子的调控。细胞胞浆内游离钙离子浓度是调节各种反应的关键，胞内存在各种复杂的钙调控机制以保持它的平衡，所以它的实时定量检测显得十分必要[1]。本研究通过对细胞内钙离子浓度变化的测定，探讨大鼠输尿管平滑肌细胞内游离钙离子变化对于平滑肌细胞结构和功能的影响，为进一步阐明输尿管部分梗阻对平滑肌细胞损伤的作用机制提供实验室依据。

    1 材料与方法

    1.1 PUUO大鼠模型的建立及实验分组[2-3]

    (350±25)g Wistar雄鼠，随机分为单侧输尿管部分梗阻(PUUO)组和对照组。将大鼠用10%水合氯醛腹腔注射(0.3m l/100mg)，仰卧位固定，作左侧纵行切口长3～4 cm。仔细游离出左侧输尿管，在腰大肌腹侧做一纵行切口，将左侧输尿管上12段腰大肌包埋于纵行切口中，在肌肉切口边缘用3-0丝线缝合2针，造成输尿管部分梗阻。对照组只将左侧输尿管分离，腰大肌做纵行切口。造模成功后于8周和16周肾盂压力测定进行模型验证[4]，随机选取实验组大鼠，并与正常对照组大鼠匹配后分离输尿管平滑肌细胞进行细胞内钙离子测定 ......