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编号:1607579
大鼠脑出血灶周水肿变化与缺血改变的研究
http://www.100md.com 2011年6月1日 中国医药导报 2011年第9期
脑组织,血肿,1材料与方法,2动物模型制作,3试验分组,4脑组织HE染色及TTC染色,5水肿程度评估,6TUNEL法检测凋亡细胞,7统计学处理,2结果,1HE染色,2TTC染色,3水肿程度评估,4凋亡细胞检测,3讨论
     胡 明,牛小媛

    山西医科大学第一附属医院神经内科,山西太原 030001

    脑出血是神经科常见病,在常规治疗后,大约有1/3的脑出血患者在发病后一段时间内仍出现进行性神经功能恶化,提示除血肿引起的急性神经组织损害外,还存在有血肿周边的继发性损害。这部分患者在影像学上表现为持续存在的环形低密度影,对于此区域的认识集中在水肿带和缺血梗死带两方面。脑水肿主要与细胞内外异常液体积聚有关,主要分成血管源性脑水肿和细胞毒性脑水肿,由于病变的程度以及病情发展的不同,这两类脑水肿常常同时存在[1-2];Forbes等[3]对出血灶区域的DWI及MRIT2加权像研究发现:血肿周围除水肿外还是存在缺血带。可见对于此区域水肿与缺血共存可以达到共识,但水肿、缺血随时间的变化关系,至今还未有很明确的答案。本实验通过比较不同时间点大鼠ICH模型血肿灶周的水肿与缺血的变化过程,探讨大鼠脑出血水肿高峰期后灶周水肿及缺血的变化。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 SD雄性大鼠,体重200 g左右,由山西医科大学动物实验中心提供。

    1.1.2 试剂 2%TTC溶液、TUNEL试剂盒均购于山西省太原市boster试剂公司。

    1.1.3 仪器 立体定位仪、必要手术器械;方正V70+扫描仪、计算机设备及软件。

    1.2 动物模型制作

    大鼠术前8 h禁食,不禁水。参照 Deinsberger[4]、周中和等[5]的报道方法,采用二次注血/退针法:缓慢注射自体血100μl至基底节区制成大鼠ICH模型;对照组相同部位打孔进针,不注血。实验阳性大鼠选择参照Bederson等[6]的方法:神经功能缺陷评分≥2分,及大鼠脑切片中有明显的圆形、椭圆形或不规则的血肿存在为模型成功标准,血液针道反流、进入脑室或死亡者均剔除。

    1.3 试验分组

    SD大鼠45只,30只造模。按起病后不同时间各分为3、5、7、14、21 d 5 个组,每组各 9 只(3 只对照+6 只模型)。

    1.4 脑组织HE染色及TTC染色

    各组大鼠于ICH损伤后在相应的时间点用过量的水合氯醛麻醉,直接断头取脑,完整取出脑组织,用滤纸吸干脑组织表面的液体和血迹,-20℃冰箱冷冻20~30 min,以进针点所在且垂直于大脑纵裂的冠状面为中心(尽量通过血肿中心)切分脑组织为前后两部分 ......

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