徐冬香，游庆华，王爱华，叶惠英

    1.上海市复旦大学附属华山医院南汇分院内分泌科，上海 201300；2.上海市复旦大学附属华山医院南汇分院病理科 201300

    在恶性肿瘤的发生和发展过程中，细胞凋亡异常具有非常重要的作用，即肿瘤的发生发展中往往伴有抑凋亡基因的表达增强或促凋亡基因的受抑。Survivin和Smac是一组重要的且功能相互拮抗的凋亡调控蛋白。我们应用免疫组织化学法检测Survivin和Smac在甲状腺肿瘤中的表达情况，并分析Survivin表达与临床病理因素和Smac的关系。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料

    选取2000年1月～2009年2月在我院外科行手术治疗的甲状腺肿瘤患者80例，其中，男10例，女70例；年龄14～78岁，平均40岁；病程1 d～10年，平均3年。

    1.2 方法

    1.2.1 病理检查 标本均经10%中性甲醛固定，常规石蜡包埋切片，HE染色，按照WHO(2003)甲状腺肿瘤诊断和分类标准由两位高年资病理医师明确诊断并行病理组织分型。

    1.2.2 检测方法 采用Envision两步法，兔抗人多克隆抗体Survivin，工作浓度1：150；兔抗人多克隆抗体Smac，工作浓度1∶200。脱蜡、水化组织切片；预处理组织切片；蒸馏水漂洗，置于PBS中10 min；一抗孵育10～30 min；PBS漂洗10 min；EnvisionTM 孵育 10～30 min；PBS漂洗 10 min；色源底物溶液孵育10 min；蒸馏水漂洗；苏木素复染及封片。已知阳性切片作阳性对照，PBS代替一抗作为阴性对照。

    1.3 结果判定

    采用半定量积分方法[1]，以细胞质和细胞核出现淡黄至棕黄色为阳性。高倍镜下按阳性细胞所占百分比进行结果判定，即高倍镜下随机观察计数10个高倍视野(×200)。根据阳性细胞数和显色强度分为4级，(-)：阳性细胞数<5%或无阳性物质的表达；(+)：阳性细胞数为 5%～25%；(++)：阳性细胞数为 26%～50%；(+++)：阳性细胞数>50% ......