张雄飞，潘道波

    湖南省常德市第一人民医院麻醉科，湖南常德 415000

    肢体缺血再灌注(IR)较单纯缺血时的损伤更损重，还可引起远隔多器官损伤[1]，虽然损伤的机制尚未完全明确，但与再灌注后中性粒细胞被激活，呼吸爆发释放大量氧自由基及炎性细胞释放大量炎性介质有关[2]。盐酸戊乙奎醚是新型选择性抗胆碱药物，对中枢和周围神经均具有很强的抗胆碱作用，作用全面、持续时间长，高度选择性M1、M3受体拮抗作用，而对M2受体无明显作用，在I/R和细胞保护功能上的作用越来越受到重视，但作用机制尚不明确[3]。本研究探讨了盐酸戊乙奎醚对大鼠双下肢缺血再灌注后心肌细胞凋亡的影响，为临床应用提供可能的方向。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    SD大鼠60只，由徐州医学院实验动物中心提供，清洁级，雄性，体重(212±30)g，置实验室环境中饲养 1周，自由摄食饮水。

    1.2 试剂

    SOD试剂盒、考马斯亮兰蛋白测定试剂盒和MDA试剂盒、MPO试剂盒 (南京建成生物工程研究所)，IL-10、TNF-α试剂盒，Bax和Bcl-2免疫组化试剂盒及细胞凋亡检测试剂盒(武汉博士德生物工程研究所)。

    1.3 肢体缺血再灌注模型动物的制备

    大鼠术前12 h禁食，自由饮水。10%水合氯醛3 ml/kg腹腔内注射麻醉，4 h后追加1/2量。双侧股三角处切开皮肤，分离出股动脉，用无创微动脉夹于近腹股沟韧带处夹闭股动脉，使双下肢缺血，缝合创口。以扪不到足背动脉搏动、双足变暗变凉为缺血成功的标志。4 h后打开原切口，去除动脉夹恢复双下肢血流，再灌注4 h，动脉搏动恢复，双足逐渐变红变暖，为建模成功。

    1.4 实验分组及处理

    实验大鼠随机分为三组，分组各20只。①缺血再灌注组(H组)：再灌注前30 min腹腔注射2 ml生理盐水；②盐酸戊乙奎醚组(M组)：再灌注前30 min腹腔注射盐酸戊乙奎醚2 mg/kg(用生理盐水稀释至2 ml)；③对照组(C组)：行假手术处理，无缺血再灌注，余手术麻醉步骤同①②。

    1.5 标本采集及处理

    三组随机各取10只观察24 h存活率 ......