李 明，马建新，王忠明，侯吉棉，周 杰

    江苏省连云港市第二人民医院放疗科，江苏连云港 222023

    乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，发病率占全身各种恶性肿瘤的7%～10%，全世界每年发患者数达130万例，每年约有50万人死于乳腺癌。近年来其发病率呈逐年上升趋势，城市中乳腺癌的发病率为女性恶性肿瘤的第二位，已经成为威胁妇女健康的严重疾病之一。随着科技的发展，在乳腺癌的治疗方面虽取得了一定的进展，但仍有较多患者出现复发和远处转移等并发症[1]。热休克蛋白(HSP)是一类保守的细胞内源性保护蛋白，可以被许多不利的情况包括高温、缺血、缺氧、重金属、代谢性毒物等多种应激所诱导，其作用就是保护细胞，参与细胞损伤的修复过程。但热休克蛋白的表达同时也保护了肿瘤细胞，使得肿瘤细胞的辐射敏感性降低，不利于放射治疗。槲皮素又名栎精、槲皮黄素，早期作为祛痰、止咳、降低血压、增强毛细血管抵抗力、降血脂等方面的药物，近年来发现其具有抗肿瘤、抗炎、消除自由基、抑制热休克蛋白表达等多种生物活性[2]。本实验主要是利用槲皮素抑制热休克蛋白的表达来研究乳腺癌MCF-7细胞辐射敏感性的变化。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    RPMI 1640培养基(购自Gibco公司)；胰酶(购自Am-resco公司)；小牛血清(杭州四季青产品)；槲皮素(购自Gibco)；BSA(购自 Roche 公司)；Triton X100(购自 Amersharm 公司)；乙醇、Tris碱和氯化钠(均购自国药集团)。MTT、Giemsa染剂(美国 Sigma，华美分装)；SDS、HEPES(购自华美生物工程公司)。倒置相差显微镜 OLYMPUS CK40；THERMO FORMA3111 CO2培养箱；光学显微镜OLYMPUS CK40；酶标仪BIO-TEK；流式细胞仪 BECKMANCOULTERFC500；血细胞计数板、96孔板等。

    1.2 方法

    1.2.1 照射条件 采用西门子PRIMUS型医用电子直线加速器产生的6 mV高能X射线照射，照射剂量率为300 cGy/min，源皮距为100 cm，加1 cm厚度组织补偿物。

    1.2.2 细胞培养与处理条件 MCF-7细胞采用RPMI 1640培养基加10%的小牛血清在37℃、5%CO2条件下培养 ......