刘 涛 ，李建瑞 ，严江伟 ，李玲香 ，王利伟 ，

    1.北京市垂杨柳医院耳鼻咽喉科，北京 100022；2.中国科学院北京基因组研究所，北京 100029；3.内蒙古医学院附属医院耳鼻喉科，内蒙古呼和浩特 010059

    耳聋是最常见的残疾之一，其发病率高、病因复杂、治疗困难，给个人、家庭及社会带来巨大的压力和沉重的负担。据各国统计，每1000名新生儿中，有1～3例听力障碍儿童，其中至少一半与遗传因素有关。研究表明，线粒体(mtDNA)12SrRNA基因A1555G点突变能引起氨基糖苷类药物敏感性耳聋(aminoglycoside antibiotics induced deafness，AAID)[1]，占遗传性聋1%～2%[2]。目前国内用于检测线粒体 12S rRNA基因第1555位A>G均质性突变的方法为：PCR扩增线粒体DNA片段，限制性内切酶分析(RFLP)和 DNA序列分析[3]。本文采用常规流行病学的研究方法结合分子生物学的手段，于2006年7月～2010年10月对内蒙古鄂尔多斯市特殊教育学校102名非综合征型感音神经性耳聋患者的mtDNA A1555G点突变进行检测，以了解耳聋和该突变的关系。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料

    选择内蒙古鄂尔多斯市特殊教育学校学生102例。这些学生从内蒙古鄂尔多斯市下属的各个旗、县招生。其中，男56例，女46例；年龄6～23岁，平均15.65岁；蒙古族10例，汉族92例。

    1.2 方法

    1.2.1 病史资料采集 首先，通过学校给家长或监护人发放知情同意书；然后由学生和家长共同填写调查问卷。问卷包括患者的一般情况，如姓名、性别、出生年月；特别要关注患者的耳聋病史、家族中是否有同样的耳聋患者、是否用过耳毒性药物、耳聋是否与外伤有关、是否患过腮腺炎等可以引起耳聋的传染病疾病史。对患者的耳鼻喉科进行正规的专科检查和听力学评估。对所有患者行纯音测听和声导抗检查。在学校对所有患者抽取外周静脉血3 ml，低温冷冻保存。在实验室进行全基因组DNA的提取，然后进行A1555G点突变的筛查。

    1.2.2 基因组DNA的制备 用DNA提取试剂盒(QIA amp DNA Blood Mini Kit 250)提取耳聋患者的全基因组DNA ......