由莉越 ，迟淑萍 ，汪 辰 ，孙 杰 ，周婷婷 ，陈红鸽 ，赵庆国 ，程 云 *

    1.解放军第三〇二医院药学部，北京 100039；2.军事医学科学院基础医学研究所，北京 100850

    丙型病毒性肝炎是由丙型肝炎病毒(HCV)所引起，是危害人类健康的重要疾病之一，其中有很大一部分患者最终发展为肝硬化和肝癌[1]。长期以来，对于丙型肝炎慢性化和肝损伤的机制一直都在探讨之中[2]，在丙型肝炎的诊断和预后效果判断的过程中，肝生化指标的测定结果具有很重要的参考价值。此外，细胞因子重组人干扰素γ(interferon-γ，IFN-γ)、 肿瘤坏死因子 α (tumor necrosis factor，TNF-α)、重组人白介素10(interleukin-10，IL-10)都是细胞免疫应答过程中合成分泌的细胞因子，它们同其他细胞因子形成细胞因子网络，对免疫应答进行调节，同时也参与炎症反应，是重要的炎症介质。本研究采用酶联接免疫吸附剂测定(ELISA)方法检测丙型肝炎患者血清中IFN-γ、IL-10、TNF-α的表达水平，探讨3种细胞因子之间以及其与生化变量之间的相关性，有助于进一步了解HCV引起肝脏损伤的机制。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料

    慢性HCV感染者的66份外周血均采自解放军第三〇二医院2005年1月～2006年1月的住院确诊的患者。其中，男32 例，女 34例；年龄 7～77 岁，平均(51.5±18.5)岁；27 例有输血史。HCV感染的诊断根据血清抗-HCV和(或)HCV RNA检测阳性。按照2005年第11次全国病毒性肝炎会议修订的诊断标准，将患者分为轻度慢性肝炎33例，中重度慢性肝炎8例，代偿期肝硬变13例，失代偿期肝硬变12例。

    1.2 方法

    1.2.1 外周血单个核细胞(PBMC)提取后，将分离所得PBMCs用含有100 ml/L的混合人血清的完全RPMI 1640培养，稀释细胞使其终浓度为5×107/ml，以100 μl/孔加入96孔板，37℃、5%CO2孵箱中培养，72 h后收集培养上清，采用ELISA方法检测上清细胞因子IFN、IL-10、TNF-α的含量 ......