贺智英

    延安大学医学院，陕西延安 716000

    醋酸纤维薄膜电泳是以醋酸纤维薄膜作支持物的一种区带电泳技术，因其有快速省时、分辨能力强、操作简单、成本低廉、透明后利于扫描定量及长期保持等优点，被广泛应用于血浆蛋白、脂蛋白、糖蛋白、核酸及其他生物大分子的分析检测，已成为医学和临床检验的常规技术，血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验也成为了生物化学实验课程必开的基础实验项目之一。但该实验影响因素很多，每个环节的失误都会对实验结果产生影响而得不到理想的图谱，并且还造成很大浪费。笔者结合多年的实验教学经验对影响本实验结果的常见因素进行分析探讨，并提出了相应的解决对策。现报道如下：

    1 电泳前准备的影响因素

    1.1 醋酸纤维薄膜的因素

    1.1.1 醋酸纤维薄膜的选择 醋酸纤维薄膜如果厚度不一、粗面细孔不均、脆性不一，在电泳时会出现区带不均匀、白色斑点处蛋白质不泳动而影响图谱的效果[1]。对策：①购买知名度相对高的正规厂家生产的产品；②将干膜片漂浮于电极缓冲液表面，如漂浮20 s左右时，膜片出现白斑点或条纹，应舍去不用[2]。

    1.1.2 醋酸纤维薄膜的浸泡 由于醋酸纤维薄膜亲水性比较低，浸泡时间过短，不能保证膜片上有一定量的缓冲液，难以使其恢复原来多孔的网状结构，所以浸泡时间不少于30 min。浸泡时用镊子将纤维薄膜条粗面向下平稳放入缓冲液中，使其自然湿润沉下液面或用手轻摇装液外盒，不要用镊子、玻棒等器材按压纤维素薄膜沉下液面，也不要同时将多条纤维素薄膜一起放进缓冲液盒。

    1.2 标本的因素

    1.2.1 血清标本的新鲜度 不新鲜血清标本蛋白质电泳图谱α2与β之间可能会多出现一条粗而染色均匀的区带，也可能会出现电泳图谱区带不清晰，比较离散，甚至有拖尾现象[1]。有研究证明，在2～8℃冰箱保存血清标本，第1天与第2天标本中各蛋白质组分百分比变化无统计学意义，从第3天开始，标本中白蛋白百分比下降，α1-球蛋白、α2-球蛋白和β-球蛋白百分比上升均有统计学意义[3] ......