小干扰垂体特异性转录因子-1对大鼠垂体生长激素肿瘤细胞侵袭行为的影响
垂体瘤,小室,培养箱,1材料与方法,2方法,3统计学方法,2结果,1Pit-1siRNA干扰效果的检测,2pit-1siRNA对肿瘤细胞侵袭力和趋化作用的影响,3讨论
范月超,张 慧,李锦晓,李中林,纵振坤,陈 晨,冯 力,苗发安,谢满意徐州医学院附属医院神经外二科,江苏 徐州 221002
垂体生长激素腺瘤是内分泌症状活跃的一种侵袭性垂体瘤,生长激素(CH)过度分泌,被视为恶性的内分泌肿瘤,它可以造成全身各系统的损害并危及生命,虽然手术可以明显改善患者的临床症状,但术后患者的内分泌生化指标不令人满意,复发率高,因而无法达到生物学治愈。研究表明[1-2],垂体特异性转录因子-1(pituitary-specific transcription factor-1,pit-1)是重要的组织特异性转录因子,对生长激素基因表达有着重要的调控作用,不仅可以激活GH基因的表达,而且能够调控细胞生存和增生所必须的其他相关基因。Pit-1基因在垂体腺瘤的发生及侵袭行为中扮演什么样的角色,目前尚无相关研究。本实验通过设计pit-1 siRNA转染大鼠GH3型垂体瘤细胞,探讨pit-1对垂体腺瘤生物学特性的影响。
1 材料与方法
1.1 材料
大鼠垂体瘤细胞购于美国ATCC细胞库,F-12k营养富集培养基(美国Gibco公司),马血清(美国Gibco公司),胎牛血清 (杭州四季青 ),siRNA oligo (Gene Pharma),lipofectamineTM2000(美国Invitrogen公司),RT-PCR (大连宝生物)。P44/42MAPK 一抗(碧云天),Boyden小室(Millipore公司),纤维连接蛋白、Matrigel胶(BD 公司)。
1.2 方法
1.2.1 细胞培养 将GH3细胞用含15%马血清+2.5%胎牛血清的F-12K培养基培养 ......
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