郑亚萍 韩 坤

    漯河医学高等专科学校生理教研室，河南 漯河 462002

    心肌缺血再灌注损伤 (isehemia-reperfusioninjury，I/R)是心脏缺血性疾病及心外术后心肌损害的主要原因，其导致的心肌细胞凋亡被认为是再灌注损伤的重要环节。丹红注射液是由丹参与红花萃取制备而成，具有保护心血管的作用，已有动物实验提示丹红注射液对大鼠离体心脏缺血再灌有保护作用[1]，但其对缺血再灌心肌细胞的直接作用的报道较少。本研究采用心肌细胞缺血再灌注细胞模型，观察丹红注射液预处理对其的影响，初步研究其作用的可能机制。

    1 仪器与试药

    1.1 实验动物

    出生2～3 d的SD大鼠。

    1.2 试剂

    丹红注射液 (济南步长制药有限公司，批号：Z20026866)，胰蛋白酶、DMEM 培养基(均为 Sigma公司)；胎牛血清(杭州四季青公司)，鼠抗横纹肌肌动蛋白单克隆抗体、抗Bcl-2、抗Bas(均为博士德公司)，其余试剂均为市售分析纯。

    1.3 心肌细胞培养、鉴定

    取2～3 d的SD大鼠，在无菌条件下取出心室，剪碎，0.1%胰酶消化，收集细胞，离心，重悬，置于二氧化碳培养箱中孵育。根据心肌细胞和成纤维细胞贴壁时间不同，采用差速贴壁1.5 h，获得心肌细胞。免疫组化染色观察α-横纹肌肌动蛋白反应。

    1.4 缺血再灌注体外模型的建立

    将培养的心肌细胞更换无血清培养基，缺氧培养箱(95%N2、5%CO2)中培养3 h后，置10%胎牛血清DMEM 培养基，常规培养9 h ......